实验五磺胺嘧啶腹腔注射药时曲线及药动学参数计算.docx

实验五 磺胺嘧啶非静脉给药后的药时曲线及药动学参数计算

一、实验目的

了解磺胺嘧啶非血管内一次给药后血药浓度随时间变化的规律。

二、实验内容

制作磺胺嘧啶钠浓度标准曲线；

兔静脉注射磺胺嘧啶钠溶液，定时采血测血药浓度，绘制血药浓度——时间曲线；

三、实验原理、方法和手段

已知磺胺嘧啶等磺胺类药物在酸性环境下其苯环上的氨基（—NH2）将被离子化而生成铵类化合物（—NH3+）。后者与亚硝酸钠反应可发生重氮化反应进而生成重氮盐（—N＝N+—）。该化合物在碱性条件下可与麝香草酚生成橙黄色化合物。在525nm波长下比色，其光密度与磺胺嘧啶的浓度成正比。具体反应过程为：

NH2NaNO

NH2

N N Cl

NHH3C OH NaOH

N

H

CCl3COOHSO2NHR

+

SO2NHR

N

C

CH(CH3)2 3

ONa

CH(CH3)2

根据上述原理，在给受试家兔一次给予一定剂量的磺胺嘧啶后，于不同时间点采集其静

脉血样，采用比色法对各样品中磺胺嘧啶的血药浓度进行定量分析，并以血药浓度对相应时间作图，从而获得磺胺嘧啶的静脉给药后的药时曲。

四、实验组织运行要求

五、实验条件

动物3kg左右家兔一只

药品20％磺胺嘧啶（sulfadiazine，SD）、7.5％三氯醋酸、0.1％SD标准液、0.5％亚硝酸钠、0.5％麝香草酚（用20％NaOH配制）、1000u/mL肝素生理盐水、3％戊巴比妥钠、蒸馏水。

器材721分光光度计、离心机、磅秤、手术器械、动脉夹、尼龙插管（或玻璃插管、硅胶管）、兔手术台、注射器（5mL）及针头、移液器（0.01～1mL）、吸头、试管、离心管、试管架、玻璃记号笔、药棉、纱布、计算机。

六、实验步骤

麻醉：全麻或局麻均可。取兔一只（实验前禁食12小时不禁水），记录体重和性别，耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠0.8～1.0mL/kg麻醉，仰位固定于兔手术台上。

手术：颈部手术区剪毛，切皮约6cm左右，钝性分离皮下组织和肌肉，气管插管，分离出颈总动脉约2～3cm左右，在其下穿两根细线，结扎远心端，保留近心端。

耳缘静脉注射1000u/mL肝素1mL/kg。

插管：用动脉夹夹住动脉近心端，再于两线中间的一段动脉上剪一“V”型切口，插入尼龙管，用线结扎牢固，以备取血用。

取血：打开动脉夹放取空白血样0.4mL，分别放入1号管（空白管）和2号管（标准管）各0.2mL摇匀静置。而后腹腔注射20％SD1.5mL/kg，分别于注射后5、15、30、45、75、120、180、240、300分钟时由动脉取血0.2mL加到含有7.5％三氯醋酸2.7mL的试管中摇匀。标准管加入0.1％SD标准液0.1mL，其余各管加蒸馏水0.1mL摇匀。

显色：将上述各管离心5分钟（1500-2000转/分），取上清液1.5mL，加0.5％亚硝酸钠0.5mL，摇匀后，再加入0.5％麝香草酚1mL后溶液为橙色。

测定：于分光光度计在525nm波长下测定各样品管的光密度值。

试管时间（min）

试管

时间

（min）

7.5％

三氯醋酸血液（mL）

（mL）

蒸馏水

（mL）

0.5％

亚硝酸钠

（mL）

0.5

0.5％

麝香草酚

（mL）

1

光密度

浓度

μg/mL

空白管

0

2.7

0.2

0

2.7

0.2

0.1

标准液

0.1

0

标准管

充分摇

匀后离

0.5

1

16.7

取上清

摇匀

给药后

1

2.7

0.2

0.1

0.5

1

3

2.7

0.2

心5分， 充分

0.1 0.5 1

5

2.7

0.2

0.1 0.5 1

液1.5

15

2.7

0.2

0.1 0.5 1

mL

30

2.7

0.2

0.1

0.5

1

45

2.7

0.2

0.1

0.5

1

60

2.7

0.2

0.1

0.5

1

90

2.7

0.2

0.1

0.5

1

120

2.7

0.2

0.1

0.5

1

=计算血中药物浓度：根据同一种溶液浓度与光密度成正比的原理，可用空白血标准管浓度及其光密度值求算出样品管的磺胺药物浓度。公式如下：

=

样品管光密度(OD) 样品管浓度(μg/mL)

标准管光密度(OD’) 标准管浓度(μg/mL)

样品管浓度(μg/ml)

样品管光密度(OD)×标准管浓度标准管光密度(OD’)

=血药浓度(μg/mL)=样品管浓度×稀释倍数（30）

=

【结果与处理】 将所得数据填入表1中，并用计算机软件绘制药物的药时曲线。

七、实验报告

实验报告内容应包括：【实验目的】、【实验原理】、【器材】、【药品与试剂】、【结果】及

【讨论】等部分。

【结果】要对所得实验数据进行统计分