纤维素酶活力.docxVIP

氢氧化钠溶液，c（NaOH）=2mol/L

氢氧化钠溶液，c（NaOH）=2mol/L

m=8g，V=100ml

m=8g，V=100ml

以上试剂配制均缩小

以上试剂配制均缩小10倍

蒸馏水/ml2.1表一标准曲线的测定

蒸馏水/ml

2.1

管号

0

1

2

3

4

5

葡萄糖/mL

0.0

0.02

0.04

0.06

0.08

0.1

蒸馏水/mL

0.1

0.08

0.06

0.04

0.02

0.0

显色液/mL

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

0.3

沸水浴中煮沸显色10min,冷却

以葡萄糖量为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，获得线性回归方程。线性回归系数应在0.9990以上时方可使用（否则须重做）。

编号酶液/mLCMC/mL

编号

酶液/mLCMC/mL

显色液/mL

空白

0.1（煮沸5-10min)

0.3

50℃恒温30min0.3

沸水浴中煮沸显色10min,冷却

1.8

样品

0.1

0.3

0.3

蒸馏水/ml

图一：标准葡萄糖光吸收曲线

结果分析：拟合所得的标准曲线为：Y=7.439×10-4X-0.00243。拟合度为0.99917。由样品的A值，可得三份溶液的葡萄糖含量分别为：652.5ug，648.5ug，653.9ug。所以平均含量：651.6ug。

纤维素酶活力单位=651.6/0.01×30=2172ug/mg×min

【思考与讨论】

1、在测定时为使各样品和空白管处理一致，应同时加入试剂，同时放入水浴中，同时取出水浴，以使反应得进行程度一致。

2、在测溶液的OD值之前，应将溶液摇匀，摇匀的方法是用保鲜膜蒙住试管口，然后来回震荡试管。

2．纤维素酶液的浓度可根据不同酶制剂的活力而相应调整。如果酶活力高，酶浓度可小些；反之，酶活1．DNS溶液配制时，将含DNS的NaOH溶液加到含酒石酸钾钠的热水溶液中时，一定要慢倒，边倒边搅拌，以防被烫。

2．纤维素酶液的浓度可根据不同酶制剂的活力而相应调整。如果酶活力高，酶浓度可小些；反之，酶活

力低时，酶浓度则大些。

力低时，酶浓度则大些。

3．在测定时，调零用1号管液一定在相应的各管液测定完成后，方可从比色杯中弃掉。

5．用移液管或加液器加各试剂时，不能将移液管或取液枪头混用。