进出口粮谷中玉米赤霉烯酮的测定 免疫亲合柱—液相色谱法.docx

进出口粮谷中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和柱-液相色谱法

SN/T1772—2006

(9+1),以均质器高速搅拌提取2min。定量滤纸过滤，移取10.0mL滤液并加入40.0mL水稀释混匀，以玻璃纤维滤纸过滤1次～2次，至滤液澄清，随即进行免疫亲和柱净化操作。

3.4.2净化

将免疫亲和柱连接于20mL.玻璃注射器下。准确移取10.0mL(相当于0.8g样品“)上述提取滤液注入玻璃注射器中，将空气压力泵与玻瑚注射器连接，调节压力使溶液以约每秒1滴～2滴流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2mL～8mL空气通过柱体。以5mL.水淋洗往子1次，弄去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体。准确加入1.5mL,HPLC级甲醇洗脱，流速为1mL/min～2mL/min,收集洗脱液于玻璃试管中，再用氮气于55℃以下吹干，用1.0mL流动相[b]]溶解残渣，溶液过0.45pm滤膜后供液相色谱测定。

3.4.3测定

液相色谱条件

a)色谱柱；NovaPakC柱(4pm),150mm×3.9mm(内径)或相当者；

b)流动相：乙腈+水+甲醇(46+46+8);

c)流速；1.0mL/min;

d)检测波长；激发波长274nm;发射波长440nm;

e)进样量：50pL.

色谱测定

根据样液中玉米赤霉烯酮含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中玉米赤霉烯酮响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样进行测定。在上述色谐条件下，标准品色谱图参见附录A中图A.1。

3.4.4空白试验

除不加试样外，均按上述步骤进行。

3.4.5结果计算和表述

用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中玉米赤霉烯酮的含量，计算结果需将空白值扣除。

(1)

式中：

X——试样中玉米赤霉烯酮的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);

A——样液中玉米赤霉烯酮的峰面积；

A?—标准工作溶液中玉米赤霉烯酮的峰面积；

c——标准工作溶液中玉米赤毒婦酮的浓度，单位为微克每毫升(pg/mL):

V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL);

m——最终样液所代表的试样量，单位为克(g)。

4测定低限，回收率

4.1测定低限

本方法的测定低限为0.005mg/kg。

4.2回收率

4.2.1玉米中玉米赤霉烯酮的添加浓度及回收率实验数据；

器加浓度在0.005mg/kg时，回收率为73.7%~89.4%;

1)对于玉米赤霉烯酮含量较高的样品，可将提取滤液进行适当稀释，以保证玉米赤霉婚酮的含量不超过免疫亲和柱的吸附容量。

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—添加浓度在0.050mg/kg时，回收率为76.5%～90.3%;

—滞加浓度在0.500mg/kg时，回收率为87.6%～98.2%。

4.2.2小麦中玉米赤霹烯酮的添加浓度及回收率实验数据；

—深加浓度在0.005mg/kg时，国收率为76.89%~90.7%;

—深加浓度在0.050mg/kg时，回收率为78.3%～93.6%;

—深加浓度在0.500mg/kg时，回收率为86,4%～93.2%。

Foreword

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Determinationofzearalenoneincerealsfor

importandexport—Immunoaffinitycolumnand

liquidchromatographicmethod

1Scope

ThisstandardspeciflesthemethodofsamplepreparationanddeterminatlonbyImmunosffinitycol-umnandliquldchromatographyofzearalenoneincerealsforimportandexport,

Thisstancardisapplicableforthedeterminationofzearalenoneincornandwheatforimportandex-port.

2Samplepreparation

2.1preparationoftestsample

Reducethesampletoca1kgbyquartering,grindwitha