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饲料中β-阿朴-8′-胡萝卜素酸乙酯的测定高效液相色谱法
1范围
本文件描述了饲料中阿朴胡萝卜素酸乙酯的高效液相色谱测定方法。
β--8′-
本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料和混合型饲料添加
剂中阿朴胡萝卜素酸乙酯的测定。
β--8′-
本文件配合饲料、浓缩饲料、精料补充料中阿朴胡萝卜素酸乙酯的检出限为
β--8′-0.15
、定量限为,添加剂预混合饲料、混合型饲料添加剂中阿朴胡萝卜素
mg/kg0.50mg/kgβ--8′-
酸乙酯的检出限为1.5mg/kg、定量限为5.0mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期
的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括
所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T20195动物饲料试样的制备
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4原理
试样中阿朴胡萝卜素酸乙酯经水分散、乙醇和二氯甲烷提取、固相萃取柱净化,
β--8′-
用高效液相色谱仪检测,外标法定量。
5试剂或材料
除另有规定外,仅使用分析纯试剂。
5.1水:GB/T6682,一级。
5.2二氯甲烷。
5.3无水乙醇。
5.4乙腈:色谱纯。
5.5甲醇:色谱纯。
5.6二丁基羟基甲苯(BHT):分析纯。
乙腈水溶液:量取相同体积的乙腈()和水(),混匀。
5.75.45.1
1
标准储备溶液():称取阿朴胡萝卜素酸乙酯标准品(号:
5.8200μg/mL1mgβ--8′-CAS
,纯度≥)(精确至),用二氯甲烷()溶解,转移至棕色容
1109-11-195%0.01mg5.25mL
量瓶中定容,摇匀。-18ºC以下玻璃容器中避光储存(为避免反复解冻可进行适量分装),
使用前超声,有效期个月。
10min1
标准系列溶液:准确移取适量标准储备溶液(),用乙腈()稀释定容,混匀,
5.95.85.4
配制成质量浓度分别为、、、、、
0.05g/mL0.1g/mL0.5g/mL1.0g/mL5.0g/mL20.0
、的标准系列溶液。临用现配。
g/mL40.0g/mL
5.10亲水亲脂平衡固相萃取柱:60mg/3mL,或性能相当者。
5.11微孔滤膜:0.45μm,有机系。
6仪器设备
6.1高效液相色谱仪:配紫外检测器或二极管阵列检测器。
分析天平:感量为和。
6.20.1g0.00001g
6.3离心机:转速不低于8000r/min。
6.4超声波清洗仪。
6.5固相萃取装置。
6.6氮吹仪。
7样品
按GB/T14699.1
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