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采用硫代巴比妥酸法
粗酶液的分离
酶液提取方法:从6粒葡萄果实中随机称取10g果肉组织,放入预冷的研钵中,加入20mL50mmol/LpH值二7.8(内含0.5gPVPP)的磷酸缓冲液,在冰浴中研磨成匀浆,于4℃下12000Xg离心30min,分离出的上清液即为粗酶液。
酶活性测定采用四氮嗖蓝法测定
粗酶液的分离
酶液提取方法:从6粒葡萄果实中随机称取10g果肉组织,放入预冷的研钵中,加入20mL100mmol/LpH值=6.4(内含0.5gPVPP)的磷酸缓冲液,在冰浴中研磨成匀浆,于4℃下12000Xg离心30min,分离出的上清液即为粗酶液。
酶活性测定采用愈创木酚法
1.3.6多酚氧化酶ppo活性的测定
酶活性测定采用邻苯二酚法
粗酶液的分离
酶液提取方法:从6粒葡萄果实中随机称取10g样品(果肉和果皮),放入预冷的研钵中,加入20nlL50mmol/LpH值=8.8(内含0.5gPVPP、5mol/LB-筑基乙醇)的硼酸缓冲液,在冰浴中研磨成匀浆,于4c下12000Xg离心30min,分离出的上清液即为粗酶液。
酶活性测定参照Assis,Maldonado,Munoz等的方法
总酚物质含量的测定
采用比色法
4统计方法
3次试验重复的标准误差用Excel进行统计计算,用SAS软件进行显著性统计分析,采用Duncan法(也称新复极差法)检验差异显著性。
2结果与分析
1采用不同的处理方法对红葡萄采后的腐败率的影响
腐烂率直接反应葡萄的贮藏效果。由图1可知,贮藏过程中,葡萄的腐烂率均呈上升趋势,尤其以2个对照上升幅度最大。贮藏第45天时,CK
呼吸强度的影响
呼吸强度是表示组织新陈代谢大小的标志,过高的呼吸强度加速果蔬的成熟衰老,降低耐贮性。由图2可见,红地球葡萄采后呼吸没有高峰出现,属于非跃变性的果实,这与梁丽雅等
抗氧化酶系统sod
丙二醛是评价膜脂过氧化程度的重要指标,其与葡萄果实的成熟衰老同步,因此可以作为判断果实是否进入衰老阶段的指标之一
SOD作为内源活性氧清除剂,能够在逆境胁迫或衰老过程中清除植物体内过量的活性氧,维持氧代谢的平衡并保护膜结构,从而在一定程度上延缓果实的衰老过程
微生物活性的变化
红地球葡萄在贮藏过程中常发生褐变,并随着贮藏期的延长,褐变越来越明显。果实褐变是多酚氧化酶和过氧化物酶作用于多酚类底物氧化所引起的一种病理反应
多酚氧化酶(PP0)是引起果蔬酶促褐变最主要的酶,在有氧的条件下,PPO能催化酚类物质氧化为醍,醍通过聚合反应产生有色物质导致组织褐变
过氧化物酶(POD)可以催化清除植物组织中低浓度的H
许多植株在遭受寒冷、伤害、紫外辐射时,植物防卫系统特别是苯丙烷类代谢被激活,苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性迅速上升,因此PAL活性可以作为植物抗逆境能力的一个生理指标
3涂膜保鲜对抗菌性能的影响
纳他霉素具有用量少,安全性高,效果明显的优点,前人张鹏
本试验中纳他霉素复合涂膜处理的果实腐烂率和呼吸强度均要显著低于2个对照处理的果实,这与段丹萍
过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶是与植物体抗性密切相关的2种酶,PAL活性的高低是植物抗病能力大小的重要指标
4不同复配体系对红地球葡萄保鲜效果的影响
1)纳他霉素壳聚糖复合涂膜处理能明显的抑制葡萄采后腐烂的发生,并有效的抑制贮藏期间红地球葡萄呼吸强度的上升,从而延长果实的贮藏寿命。
2)纳他霉素复合涂膜处理较对照相比能提高果实超氧化物歧化酶(SOD)的活性,抑制丙二醛含量和多酚氧化酶(PPO)活性的上升,延缓果实多酚物质含量的下降,从而防止果实的氧化衰老和褐变,并且该复合处理能维持果实的过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性处于较高的水平,提高果实的抗病性。
3)质量分数为0.40%和0.60%的纳他霉素复合涂膜处理的保鲜效果都分别明显优于0.20%的纳他霉素复合涂膜处理,但2个处理组之间处理效果差异并不显著。因此,基于经济角度的考虑,选取质量分数0.40%的纳他霉素与质量分数1%的壳聚糖复合是保鲜红地球葡萄的最佳浓度。经质量分数0.40%的纳他霉素复合壳聚糖涂膜处理的红地球果实在(0±0.5)℃条件下贮藏120d后腐烂率仅为8.52%,仍具有一定的商品价值。
酶液提取方法同1.3.5o
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