微生物遗传与菌种选育新.ppt

一组：12345

二组：26789

三组：37101112

四组：48111314

五组：59121415第115页,共141页，2024年2月25日，星期天②组合补充培养基法将待测的菌点种到各种补充培养基上，逐个分析各菌的缺陷类型，或快速分离出所需缺陷类型的菌株。ABFEDCHG第116页,共141页，2024年2月25日，星期天缺陷型的应用作为菌株的遗传标记：进行基因工程、诱变育种、研究代谢过程时用作亲本标记；作为生产菌种：aa、核苷酸等生产菌种；作为aa、维生素、碱基的测定菌株。第117页,共141页，2024年2月25日，星期天一、微生物菌种的衰退二、微生物菌种的复壮三、微生物菌种的保藏第五节微生物菌种的衰退、复壮和保藏P.231第118页,共141页，2024年2月25日，星期天性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本要求，否则生产或科研都无法正常进行。第119页,共141页，2024年2月25日，星期天衰退的含义：由于自发突变的结果，而使某物种原有一系列生物学性状发生量变或质变的现象。一、微生物菌种的衰退衰退的表现形式1）原有的形态不典型2）生长速度变慢3）代谢产物生产能力下降4）致病力下降5）抗性下降第120页,共141页，2024年2月25日，星期天（一）衰退的防止方法1）控制传代的次数2）创造良好培养条件3）采用有效的菌种保藏方法4）采用不易衰退的细胞进行传代P.232第121页,共141页，2024年2月25日，星期天复壮的含义（二）微生物菌种的复壮1）狭义：是一种消极的措施，它指的是菌种已发生衰退，再通过纯种分离和性能测定等方法，从衰退的群体中找出少数尚未衰退的个体，以达到恢复该菌种原有典型性状的一种措施。2）广义：是一项积极的措施，即在菌种性能尚未衰退前就经常有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作，以期从中选择到自发的正突变体（以期菌种的生产性能逐步有所提高）。第122页,共141页，2024年2月25日，星期天复壮的方法1.纯种分离；A、平板划线分离：主要适合细菌，酵母菌，可达到菌落纯的水平。B、单孢子分离：主要适合产孢子的微生物，例霉菌和放线菌。用显微操作器进行分离，可达到细胞纯的水平。2.通过寄主主体复壮3.淘汰已衰退的个体P.232第123页,共141页，2024年2月25日，星期天二、微生物菌种的保藏目的：①不死亡，不污染，不变异——三不原则②随时为生产、科研提供优良菌种。原理：选用优良的纯种（最好是休眠体，如分生孢子、芽孢等），在干燥、低温、缺氧、缺营养以及添加保护剂等环境条件下，降低微生物代谢活动强度，抑制微生物生长繁殖，并使其难以发生突变。P.233第124页,共141页，2024年2月25日，星期天菌种保藏机构的任务：广泛收集科研和生产菌种、菌株，并加以妥善保管，使之达到不死、不衰、不乱以及便于研究、交换和使用的目的。菌种保藏机构：中国微生物菌种保藏委员会(CCCCM)美国的典型菌种保藏中心(ATCC)英国国家典型菌种保藏所（NCTC）法国里昂巴斯德研究所（IPL）国内外菌种保藏机构：第125页,共141页，2024年2月25日，星期天国家设立专门的菌种保藏机构第126页,共141页，2024年2月25日，星期天菌种保藏的方法（p234）一种良好的菌种保藏方法保持原菌的优良性状长期稳定方法的通用性操作的简便性设备的普及性第127页,共141页，2024年2月25日，星期天（1）定期移植保藏法操作方法：将菌种接种在斜面、液体或穿刺培养基上，待生长完全后，置普通冰箱4℃保藏，湿度50％～70％以下，棉塞换成不通气橡皮塞更好。第128页,共141页，2024年2月25日，星期天优点：方便，不受条件限制，各类微生物均可。缺点：时间短、传代多、易退化。低温可减缓生长速度，单细胞仍有一定的活动条件，一般4～6个月必须传代一次。第129页,共141页，2024年2月25日，星期天（2）液体石蜡法操作方法：生长完全的斜面上覆盖无菌的液体石蜡，液面高于斜面1cm，普通冰箱保藏。第130页,共141页，2024年2月25日，星期天加上石蜡可防止培养基水分蒸发，也可隔氧，保藏时间1～2年，除石油发酵微生物外，各