高效液相色谱仪的几个使用问题 液相色谱解决方案.pdfVIP

液相色谱解

决方案

1.色谱柱中的流动相见排干吗？

不少做色谱分别试验的人碰到过这样的情形：不慎未适时补充

流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作

了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中全部流动相

都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，假如泵将溶剂瓶中的流动

相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充分了空气，泵也不

会将空气排入色谱柱。由于泵只能输送液体，而不能输送空气。相

比之下，另一个更可能发生的情况是忘掉盖上色谱柱两端的密封盖

或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干枯的情况不太简

单发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉全

部溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，

也不愿定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低

的溶剂（如经氦气脱气的甲醇）冲洗色谱柱以除去气体。较低的表

面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应当能够溶解并去除滞

留在填料中的气体。色谱柱大约需要（以1mL/min的流速）冲一个

小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。2.使用PEEK

（polyetheretherketone）管路和接头需要注意什么问题？

假如常常需要更改流路或更换不同品牌的色谱柱，使用PEEK

材料制成的管路和接头会特别便利。PEEK管路简单连接；PEEK接头

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便利与不同品牌或规格的色谱柱相连接。

使用此类材料的管路需要注意的是：PEEK对卤代烷烃和四氢

呋喃的兼容性不好。虽然未察看到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹

象，但PEEK碰到上述溶剂会变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。

不锈钢管可耐受6000psi的压力，但PEEK管只能耐受近4000psi

（但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi）。

使用PEEK接头时则无需挂念接头耐溶剂性能，由于接头几乎

或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢

管，因而压力太高时，可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或

漏液。3.如何防备液相泵的故障:

要保持泵的良好操作性能,必需维护系统的清洁,保证溶剂和试

剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出防备泵故障的几项措

施:

1）、用高质量试剂和HPLC级溶剂；

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2）、过滤流动相和溶剂；

3）、脱气；

4）、每天开始使用时放空排气，工作结束后从泵中洗去缓冲液；

5）、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中；

6）、定期更换垫圈；

7）、需要时加润滑油；

8）、查阅有关泵操作手册中的其它建议。

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处于良好操作状态的泵，应当能使色谱图上的基线平稳；保留

时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力

变化应是缓慢和平稳的。为了使故障发生后尽快排出，平常应

常备密封、单向阀（入口与出口）、泵头装置、各式接头、保险丝

等部件，以及更换工具。

潮湿环境中如何维护液相色谱仪

操作人员最挂念的是分析结果，而检测器是HPLC的眼睛。由于

很多时候天气潮湿，很简单使检测器精密的光学部件性能受到影响，

导致灵敏度下降或波长检验通不过，更严重者：灯电路板、预放大

板及CPU板同时被短路击坏。而这类情况在干燥的北方地区则比较

少。由此可见，潮湿气候对仪器损害之大。

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在多雨季节到来之前，勿请用户将液相色谱仪调整放置在通风

条件好，湿度低（70%）的试验室内。同时，给试验室配备去湿机、

空调及通风装置。表面上看，虽然加添了支出，但您的实际回报将

大大超出您的支出。

HPLC以它定量分析结果精准、分析周期短