防疫物资采购新冠病毒检测试剂盒性能方案.doc

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防疫物资采购新冠病毒检测试剂盒性能方案

目录

TOC\h\z\u第一节新型冠状病毒(2019-nCoV)抗体检测试剂盒 1

一、原理 1

二、抗体检测优势 2

三、分类 2

四、检测原理（以IgM抗体为例） 2

五、各种检测方法的特点 4

六、适用范围 4

七、操作步骤（以国械注准20203400240为例） 4

八、标本运输 5

九、临床意义 6

第二节新冠病毒核酸检测试剂 6

一、新冠病毒核酸检测方法 6

二、新冠病毒核酸检测实验室生物安全要求 7

三、新冠病毒核酸检测结果 8

四、新冠病毒核酸检测流程 9

第一节新型冠状病毒(2019-nCoV)抗体检测试剂盒

一、原理

新型冠状病毒(2019-nCoV)抗体检测试剂盒用于快速定性检测人类全血、血清、血浆中的新型冠状病毒IgM/IgG抗体，最快可在15分钟内肉眼观察获得检测结果。

二、抗体检测优势

1.与核酸联合检测提高检出率。

2.采样的问题可能使核酸检测出现假阴性的情况，抗体检测采样较均一。

3.抗体检测有效帮助提高疑似病例的确诊率。

4.实验室要求低，利于各级医院广泛展开。

5.流行病学研究提供支持数据。

三、分类

按检测原理不同分为以下四类：

1.新型冠状病毒IgM/IgG抗体检测试剂盒（胶体金法）

2.新型冠状病毒IgM/IgG抗体检测试剂盒（荧光免疫层析法）

3.新型冠状病毒IgM/IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

4.新型冠状病毒IgM/IgG抗体检测试剂盒（化学发光法）

四、检测原理（以IgM抗体为例）

1.胶体金法（以间接法为例）

新型冠状病毒(2019-nCoV)IgM抗体检测试剂盒（胶体金法）的检测原理是胶体金标记鼠抗人IgM，同时硝酸纤维素膜上包被新型冠状病毒抗原，利用胶体金免疫层析间接法的原理达到检测人血清中新型冠状病毒IgM抗体的目的。

2.荧光免疫层析法

新型冠状病毒IgM抗体检测试剂盒（荧光免疫层析法）的原理是基于干式荧光标记技术和免疫层析技术，采用全血、血清或血浆作为样本，配套全自动荧光免疫定量分析仪，全自动穿刺进样，实现“样本进、结果出”，最大程度避免产生气溶胶，降低对操作者和环境污染风险。

3.酶联免疫法（以捕获法为例）

新型冠状病毒IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法）的原理是应用捕获酶联免疫吸附分析法，采用抗人IgM单克隆抗体包被反应板，加入校准品或稀释后的样品，样品中的病毒IgM抗体与已包被的单克隆抗体结合形成抗人IgM抗体-IgM抗体复合物，洗涤后加入HRP标记的2019-nCoVN蛋白抗原（E蛋白抗原或S蛋白抗原），形成抗人IgM抗体-IgM抗体-2019-nCoVN蛋白抗原-HRP复合物。洗板后加入TMB底物，复合物上连接的HRP催化底物生成蓝色物质，加入终止液后变成黄色，在450nm波长处有特异吸收峰。通过峰值高低对人血清中的2019-nCoVIgM抗体进行定性检测。

4.化学发光法（以间接法为例）

新型冠状病毒抗体检测试剂盒（化学发光法）的原理是高科技材料磁珠标记病毒的重组蛋白，用于结合血液样本中的病毒抗体IgM，再使用二抗来识别抗体。二抗上面偶联了碱性磷酸酶，加入底物后会产生光信号，化学发光仪器通过高灵敏度的PMT（光电倍增管）来检测光子，从而实现pg(皮克)级别的高灵敏度检测。

五、各种检测方法的特点

胶体金法操作便捷，可直接目视判读，一般15分钟左右即可完成检测；免疫荧光层析法与胶体金法一样操作便捷，检测迅速，但需要仪器判读；酶联免疫法可采用常规酶标仪判读，一般灵敏度较高，但检测时间较长（约1.5小时左右），而且操作步骤较多，操作过程中应采取措施避免感染。化学发光法一般灵敏度亦较高，采用全自动化学发光免疫分析仪，无需过多手工操作即可完成检测，检测时长一般约半小时。

六、适用范围

用于体外定性检测人血清、血浆和静脉全血样本中新型冠状病毒（2019-nCoV）IgM/IgG抗体。仅用作对新型冠状病毒核酸检测阴性疑似病例的补充检测指标或疑似病例诊断中与核酸检测协同使用，不能作为新型冠状病毒感染的肺炎确诊和排除的依据，不适用于一般人群的筛查。仅限医疗机构使用。

七、操作步骤（以国械注准20203400240为例）

1.取出试剂盒，室温平衡20~30分钟。

2.滴加血清或血浆样本10μL，滴加全血样本20μL于反应孔中，待液体充分吸入。

3.滴加样本稀释液2滴于反应孔中，待液体充分吸入。

4.1-15分钟可判读结果。

阳性结果：检测开始后1-15min，检测卡C线和T线位置均出现条带。

阴性结果：15min内仅有检测卡C线位置出现条带，T线位置不出现条带。

无效结果：15min内检测卡C线和T线位