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一、目的
1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。
2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
二、原理
多糖?单糖?丙酮酸?酸性产物(或产酸产气)?ph下降?指示剂呈酸性变色(若产气者有气
泡出现)。
不同的细菌可根据分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是
否产酸,可在糖发酵培养基中加入指示剂(通常为溴甲酚紫,即b.c.p,其ph在5.2以下
呈黄色,ph在6.8以上呈紫色),经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气可在发
酵培养基中放入倒置小倒管观察。
不同的微生物具有发酵不同糖(醇)的酶类,所以发酵途径及发酵产物各不相同。例
如:大肠杆菌能使乳糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则不能;大肠杆菌能使葡萄糖发酵,产酸
产气,而伤寒杆菌则只产酸、不产气。
糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数
细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。有些细
菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢气、甲烷、二氧化碳等);
有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌分解葡萄糖
产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。发酵培养基
含有蛋白胨,指示剂(溴甲酚紫),倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时,溴甲酚
紫指示剂可由紫色(ph6.8)变为黄色(ph5.2)。气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气
泡来证明。
三、器材
1.菌种大肠杆菌,普通变形杆菌斜面各一支。
2培养基葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管各3支(内装有倒置的德汉氏小
管)。3仪器或其他用具试管架,接种环等。
四、操作步骤
1.用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种的细菌菌名。
2取葡萄糖发酵培养基试管3支,分别接入大肠杆菌,普通变形杆菌,第三支不接种,
作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支,同样分别接人大肠杆菌,普通变形杆菌,第三支
不接种,作为对照。
在接种后,轻缓摇动试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气泡。
3将接种过和作为对照的6支试管均置37培养24~48h。
4.观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡。篇二:发酵实习实验报告
第一部分、实验部分
实验一、酸乳的制作
一、实验目的
1、掌握酸乳的制作方法、基本原理;
2、了解发酵剂制备过程中的操作要点;
3、对最终产品进行感官评定及理化检测,并进行品质比较。
二、基本原理
酸乳也成为酸牛奶,是人们喜欢的饮用发酵乳。所谓发酵乳、鲜乳或乳制品等主要原料
添加乳酸菌,发酵以后形成的具有特殊风味的乳制品。乳经过发酵制成发酵乳以后营养价值提
高,发酵乳中的蛋白质、钙盐容易消化吸收,具有消化、抑制肠道内异常的发酵和杀死肠道中
的有害菌的作用。
酸奶是以牛奶为原料经过均质、消毒、发酵等过程加工而成的。酸乳的品种很多,根据
发酵工艺的不同,可以分为凝固型酸乳和搅拌型酸乳两大类。凝固型酸乳在接种发酵菌株后,
后在进行无菌灌装并后熟。其基本原理就是通过乳酸菌发酵牛奶中的乳糖产生乳酸,乳酸使牛
奶中酪蛋白(约占全乳的,占乳蛋白的85%)变性凝固而使整个奶液呈凝乳状态。同
时,通过发酵还可以形成酸奶特有的香味和风味,本实验主要学习凝固型酸奶的制作方法。
三、实验材料
1、材料:纯牛奶、白糖、酸牛奶
2、仪器:电炉、水浴锅、电子天平、恒温培养箱、相关玻璃器皿
四、实验步骤
1、取2000ml纯牛奶放入锅中加热;
2、当达到一定温度后,按照8%的比例加入160g白糖,搅拌溶解
3、将牛奶加热到90;
4、小组分装,每个三角瓶中加入50ml的牛奶,
5、将分装好的牛奶放到95℃的水浴锅中,灭菌5min
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