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实验动物学实验报告
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实验一:小鼠实验
一、实验目的
1、掌握小鼠抓取、固定的基本方法;
2、掌握小鼠的雌雄鉴别方法;
3、掌握小鼠的标记方法;
4、掌握小鼠的基本采血技术;
5、掌握小鼠的常用给药方法;
6、掌握小鼠的解剖方法,熟悉内部脏器的自然位置;
二、实验材料
1、实验动物:每组两只雌鼠,两只雄鼠;
2、实验器械及试剂:鼠笼;小鼠固定器和小鼠固定板;眼科剪;眼科镊;解剖刀;1ml注射器;毛细玻璃管;灌胃针;苦味酸染料;葡萄糖液;2%水合氯醛;
三、实验内容及方法
1、小鼠的抓取和固定
抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。
2、小鼠的雌雄鉴别
雄鼠的阴囊明显,雄鼠可见阴道开口和五对乳头。幼鼠或仔鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定,近者为雌,远者为雄。另外,雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟,而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛。
3、小鼠的标记方法
1)耳孔法
用耳号钳在耳上打洞或者用剪刀在耳边缘剪缺口,左耳为十位,右耳为个位。
2)剪趾法
适用于出生一周以内新生仔鼠;
3)染色法
用毛笔将苦味酸涂在动物的不同部位,注意逆着毛发生长方向刷。
4、小鼠的基本采血
1)剪尾采血
当所需血量很少时采用本法。固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟,也可用酒精棉球涂擦,使局新血管扩张。将鼠尾擦干,再用刀片剪去1-2mm,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取,同时自尾根部向尾尖按摩。取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾势脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向切割,每次可取0.2~0.3ml血,切割后用棉球压迫止血。这种采血方法在大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。
2)眼眶后静脉丛取血
当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突(示眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。刺入深度小鼠2~3mm。当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流人玻璃管中。得到所需的血量后,拨出毛细管。若手法恰当,小鼠约可采血0.2~0.3ml。
3)心脏取血
动物仰卧固定在固定板上,剪去心前区部位的被毛,用碘酒酒精消毒皮肤。在
鼠尾静脉有两根,左右两侧各一根。操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中,使尾巴露出,尾部用45~50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张,并可使表皮角质软化,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,用中指从下面托起尾巴,以无名指和小指夹住尾巴的末梢,右手持注射器,使针头与静脉平行(小于30℃),从尾下四分之一处(约距尾尖2-3厘米)处进针,此处皮薄易于刺入,先缓注少量药液,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射,应尽可能从末端开始,以后向尾根部方向移动注射。动进入注射器。
6、小鼠的解剖
将小鼠放在解剖盘上,用大头针将四肢固定在解剖盘上。用酒精棉球将小鼠腹部的皮肤消毒。?用手术剪沿腹中线将小鼠的腹部和胸部的皮肤剪开,然后用手术剪将腹腔和胸腔剪开,仔细观察小鼠腹腔和胸腔的各内脏器官。
内部脏器观察
1)肺:分左右两叶,右肺分为四叶,左肺为一整叶。
2)心脏:呈圆锥状,位于近胸骨端,心尖位于第四肋间。
3)肝:附于隔上,呈暗褐色,分5叶。
4)胃:分贲门、幽门、胃底及胃体。
5)肠:分小肠和大肠。小肠包括回肠、空肠和十二指肠。
6)脾:脾斜卧在胃的左侧,呈暗红色,长条扁平状。
7)胰:在十二指肠附近,呈粉红色。
8)肾:右肾比左肾位置稍高,肾脏前方有肾上腺,每肾内侧各有一根输尿管,开口于膀胱背侧。
9)卵巢和子宫:卵巢形似绿豆状,粉红色,左右各一,位于肾脏下方。小鼠为双角子宫,为Y字形。
10)睾丸:小鼠睾丸有一对,幼年时睾丸位于腹腔内,性成熟后则下降至阴囊内。
实验二:大鼠实验
一、实验目的
1、掌握大鼠抓取、固定的基本方法;
2、掌握大鼠的雌雄鉴别方法;
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