大肠杆菌的分离和培养.ppt

微生物的恒温培养第31页,共36页，2024年2月25日，星期天菌种的保存接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。第32页,共36页，2024年2月25日，星期天1.培养基灭菌后，需要冷却到60℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。第33页,共36页，2024年2月25日，星期天3.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。第34页,共36页，2024年2月25日，星期天1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。第35页,共36页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第36页,共36页，2024年2月25日，星期天******关于大肠杆菌的分离和培养指结构简单,形体微小的单细胞、多细胞或无细胞结构的低等生物。一、微生物90%以上的微生物是对人类有利的。微生物的类群病毒

细菌

蓝细菌

放线菌

酵母

霉菌

原生动物病毒原核生物真菌原生动物第2页,共36页，2024年2月25日，星期天细菌细胞由外向里依次有:

鞭毛和菌（纤）毛

荚膜

细胞壁

细胞膜

细胞质

拟核区(类核区)1、细菌的构造图1-3细菌的结构繁殖方式：分裂繁殖（20min分裂一次）第3页,共36页，2024年2月25日，星期天2、菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。第4页,共36页，2024年2月25日，星期天菌落细菌的菌落特征因种而异第5页,共36页，2024年2月25日，星期天碳源氮源生长因子无机盐水微生物需要的五大类营养要素物质3、培养基培养基（培养液）是人工方法配制而成的，是微生物生存的环境和营养物质。第6页,共36页，2024年2月25日，星期天1）培养基的成分（a）细菌培养基：特殊成分：蛋白胨、酵母提取液、氯化钠酸碱度：中性偏碱（b）霉菌培养基：特殊成分：无机物或添加蔗糖的豆芽汁酸碱度：中性偏酸第7页,共36页，2024年2月25日，星期天2）培养基的种类（1）按物理性质分:a.固体培养基通常加琼脂，作为凝固剂（凝固剂的要求：不被微生物利用，又可使培养基固化，且不影响培养基中的其他营养物被细菌吸收）作用：分离（纯化）细菌、计数、保留菌种等b.液体培养基不加琼脂等凝固剂其它成分与固体培养基相同作用：培养细菌第8页,共36页，2024年2月25日，星期天液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长第9页,共36页，2024年2月25日，星期天固体培养基：菌落第10页,共36页，2024年2月25日，星期天（2）根据化学成分分合成培养基——成分明确天然培养基——成分不明确第11页,共36页，2024年2月25日，星期天（3）按培养基的用途分类a．基础培养基（LB培养基）:含有一般细菌生长繁殖需要的基本的营养物质。最常用的基础培养基是上面提及的天然培养基中的牛肉膏蛋白胨培养基。b．营养培养基（加富培养基）:在基础培养基中加入某些特殊营养物质，如血液、血清或生长因子等。用以培养对营养要求高的微生物。第12页,共36页，2024年2月25日，星期天c、选择培养基——在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长,如尿素固体培养基可以分离以尿素为氮源的微生物。d、鉴别培养基——在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物,如伊红和美蓝,和大肠杆菌的代谢产物结合,使菌落呈深紫色,