VitA偶联脂质体包裹MMP-2 siRNA靶向预防肝纤维化的体外研究的开题报告.docxVIP

VitA偶联脂质体包裹MMP-2siRNA靶向预防肝纤维化的体外研究的开题报告

一、研究背景

肝纤维化是肝炎、酒精性肝病等肝脏疾病的常见病理过程，其主要特征是肝脏中的胶原增多，导致肝功能不全。肝纤维化的治疗方法目前仍然有限，因此需要寻求新的治疗方法。

近年来研究发现，MMP-2是肝纤维化的重要因素之一。MMP-2是一种基质金属蛋白酶，它能够降解胶原和纤维蛋白等基质组织，从而防止肝纤维化的发生。因此，针对MMP-2的阻断可能是治疗肝纤维化的一种有效途径。

脂质体是一种能够包裹siRNA等生物大分子的纳米粒子，能够在体内靶向递送。VitA偶联脂质体在肝脏具有良好的靶向性，能够特异性地递送药物到肝脏，因此被广泛应用于治疗肝脏疾病。

二、研究目的

本研究旨在探讨VitA偶联脂质体包裹MMP-2siRNA对肝纤维化的预防作用，为肝纤维化的治疗提供新的思路。

三、研究方法

1.细胞培养

采用人肝星状细胞（HSF）作为研究对象，进行体外实验。HSF细胞通过DMEM培养基添加10%胎牛血清培养，放置在37℃的孵化箱中。

2.VitA偶联脂质体包裹MMP-2siRNA的合成和制备

采用包膜法制备MMP-2siRNA包裹VitA偶联脂质体（VitA-PL）。具体制备方法为：将不同比例的MMP-2siRNA、VitA-PL和淀粉酸溶液混合，加入盐水中，经过搅拌、超声处理等步骤，制备出VitA-PL包裹的MMP-2siRNA。

3.细胞毒性实验

采用MTT法检测不同浓度的VitA-PL对HSF细胞的毒性，确定最佳用药浓度。

4.Westernblot实验

采用Westernblot法检测VitA-PL包裹的MMP-2siRNA对HSF细胞MMP-2表达的抑制作用。

5.细胞凋亡实验

采用TUNEL法检测VitA-PL包裹MMP-2siRNA对HSF细胞凋亡的作用。

四、研究意义

本研究将探讨新的肝纤维化治疗途径，同时也为了应用脂质体等纳米技术构建其他药物靶向递送途径提供了参考。