中和试验完整版本.pptVIP

参考文献[1]ArapidmicroneutralizationassayforcytomegalovirusJournalofVirologicalMethods,14(1986)37-41[2]ArapidmicroneutralizationassayforthemeasurementofneutralizingantibodyreactivewithhumancytomegalovirusJournalofVirologicalMethods,23(1989)157-168[3]EffectofPreviousorSimultaneousImmunizationwithCanarypoxExpressingCytomegalovirus(CMV)GlycoproteinB(gB)onResponsetoSubunitgBVaccineplusMF59inHealthyCMV-SeronegativeAdults[4]RapidQuantitationofCytomegalovirusandAssayofNeutralizingAntibodybyUsingMonoclonalAntibodytotheMajorImmediate-EarlyViralProteinJOURNALOFCLINICALMICROBIOLOGY,Mar.1988,p.504-507病毒中和试验

VirusNeutralizationTest2012.7.17张文昌背景原理方法应用各种方法利弊分析发展趋势质量控制（一）背景介绍1.当病原微生物侵入机体时会诱导机体体液免疫产生相应的抗体。2.病原微生物入侵细胞时需要依赖病原体自身表达的特定分子与细胞上的受体结合，才能感染细胞，并进一步扩增。3.病毒完整的复制周期艾滋病病毒复制.flv4.病毒的中和抗体（neutralizationantibody）指：针对病毒某些表面抗原的抗体，此类抗体能与细胞外游离的病毒结合从而消除病毒的感染能力。5.中和抗体的作用机制：①直接封闭病毒表面抗原，如与病毒表面吸附蛋白（VAP）结合，从而阻断病毒的吸附②改变病毒表面结构③病毒与中和抗体形成的免疫复合物，易被巨噬细胞吞噬清除④有包膜的病毒表面抗原与中和抗体结合后，激活补体，可导致病毒的裂解图1.中和抗体作用机制Antibodiescanneutralizeviralinfectivityinanumberofways,assummarizedintheillustration.Theymayinterferewithvirionbindingtoreceptors,blockuptakeintocells,preventuncoatingofthegenomesinendosomes,orcauseaggregationofvirusparticles.Manyenvelopedvirusesarelysedwhenantiviralantibodiesandserumcomplementdisruptmembranes.6.病毒中和试验：Neutralizationofavirusisdefinedasthelossofinfectivitythroughreactionoftheviruswithspecificantibody.以测定病毒感染力为基础，以病毒受免疫血清中和后残存的感染力为依据，来判定免疫血清中和病毒的能力。常用于检测患者血清中抗体消长情况，抗原免疫原性评价，也可用来鉴定未知病毒或对病毒进行半定量等。（二）原理特异的抗病毒免疫血清（中和抗体）和病毒作用后，使病毒失去感染的能力，一种病毒只能被相应的免疫血清所中和。中和一定量的病毒的感染力必须有一定效价的中和抗体。（三）方法1.中和实验验可分为体内试验和体外试验?体内中和试验也称保护试验，试验时先对实验动物接种疫苗或抗血清，间隔一定时间后，再用一定量病毒攻击，最后根据动物是否得到保护来判定结果。常用于疫苗免疫原性的评价和抗血清的质量评价。疫苗或抗血清一定时间适量病毒致死状态等判断结果?体外中和试验是将抗血清与病毒混合，在适当条件下作用一定时间后，接种于敏感