细胞培养在生物制药领域的应用.pdf

本文对细胞培养技术在疫苗生产、单克隆抗体制备、药物筛选、

基因重组产品等生物制药领域的应用作一综述。

细胞培养在生物制药领域的应用【1】

【摘要】经过长时间的研究与实践，细胞培养技术已经得到了充

分的发展与完善，离体培养的动物细胞具有可以人为控制的培养条件

且结果便于观察的特点，因而被广泛应用于生物制药领域中并对该领

域产生了巨大而深远的影响。

本文对细胞培养技术在疫苗生产、单克隆抗体制备、药物筛选、

基因重组产品等生物制药领域的应用作一综述。

【关键词】细胞培养生物制药应用

随着生命科学理论和技术的飞速发展，细胞培养技术的地位和作

用日益成熟，动物细胞培养的研究取得了可观的效果，并且有着无限

的应用发展前景。

主要的发展目标包括：开发生长密度高、目标产品分泌量大的细

胞系;研制性能优良、吸附与解离容易、重复利用的微载体;开展规模化

的生物反应器、检测系统、细胞培养与产物分离耦合系统等;设计新型

培养基促进生物制品安全;研究三维细胞的培养条件[1]。

生物制药即运用生物化学、医学、微生物学等原理和方法，利用

生物机体、组织、细胞、体液等生产具有预防、诊断和治疗功能的药

物制品。

有关研究者采用基因重组技术或其他创新生物技术生产治疗性药

物，主要产品有基因工程药物、抗体工程药物、疫苗等几类。

这些产品的开发研制及生产过程都离不开细胞培养技术。

1疫苗生产

疫苗免疫是最有效的预防感染性疾病的措施之一。

疫苗免疫是指利用病毒性制剂、细菌性制剂及类毒素等人工主动

免疫制剂，通过作用于机体的免疫防御系统起到免疫应答作用。

球大流行、微生物感染、内毒素残余量多等问题时，传统的鸡胚生产

方法可能难以满足疫苗市场的需求。

随着细胞培养技术的完善及其优点的体现积极推进使用细胞培养

技术替代鸡胚培养技术生产流感疫苗，未来将会越来越多依靠细胞培

养技术获得理想的疫苗。

与此同时也存在一些缺陷，尤其是哺乳动物细胞培养的病毒疫苗

特别适合于工业的发展，应用微载体大规模培养细胞生产流感疫苗，

使得流感病毒适应传代细胞(如VERO细胞)，该细胞不仅培养条件要求

不高而且遗传性状稳定，对多种病毒的感染敏感[2]，如利用生物反应

器大规模进行病毒繁殖，可实现流感疫苗的规模化生产。

MDCK细胞系是被公认为最适于生产甲、乙型流感病毒疫苗的细

胞系，对流感病毒增殖快、感染效率高，且不易变异[3]。

其中典型代表，如巴斯德公司利用1000L反应器微载体培养Vero

细胞生产人用狂犬病疫苗和脊髓灰质炎疫苗。

由此可见，利用细胞培养疫苗已成为目前疫苗研制的重要应用方

向。

2单克隆抗体制备

单克隆抗体是由单一B淋巴细胞克隆产生的高度均一、仅针对某

一特定抗原表位的抗体。

研究Hb在帕金森病中的发病机制，李旭颖等[4]制备抗Hb单克

隆抗体，由重组人Hb作为抗原免疫小鼠，并将其细胞融合及细胞培养

制备成杂交瘤，经过筛选获得抗人Hb单克隆抗体杂交瘤株，体内诱生

法制备腹水经过酶联免疫吸附试验等方法进而获得特异性抗Hb单克隆

抗体。

张培等[5]制备乙型脑炎病毒的单克隆抗体通过动物免疫、细胞融

合、克隆和筛选等方法，应用ELISA等免疫学方法进行特异性和亚型

的鉴定，为快速检测方法的建立奠定了基础。

单克隆抗体药物研发已经被列入863计划和国家重点项目，国内

已经有2个治疗性单抗产品准备生产，3个治疗性产品处于临床试验阶

31个，

目前国内正在进行临床前研究的抗体药物有：抗CEA嵌合抗体;抗破伤

风抗体及抗乙型脑炎等[6]。

3药物筛选

药物筛选是从天然或合成的化合物中筛选出高效的新药或先导化

合物。

生物活性和药理作用检测所筛选出的高效的新药或先导化合物，

并根据检测结果评价某一物质的药用前景，是新药研究的最初过程和

关键步骤。

体外二维和应用球状聚集体、细胞片层、脱细胞基质进行三维培

养肝细胞的具体技术是进