-7(09级兽医27)实验七-巴氏杆菌.ppt

实验八多杀性巴氏杆菌多杀性巴氏杆菌：可引发多种家畜、家禽的巴氏杆菌病，表现为出血性败血症，传染性肺炎或局部慢性感染。目的：

1、掌握巴氏杆菌的试验室诊断方法

2、掌握巴氏杆菌两极染色的形态特征巴氏杆菌实验室诊断主要内容：巴氏杆菌实验室诊断程序：

实验室诊断的继续分离培养操作：

在鲜血平板上进行划线分离。力求获得单个菌落。

巴氏杆菌培养特征：

在鲜血平板上生长良好，菌落淡灰色、圆形、湿润、呈露珠样小菌落，无溶血。在普通培养基上生长不良，在麦康凯培养基上不生长。

巴氏杆菌的生化特性：

不分解乳糖、吲哚试验阳性、硫化氢阳性等易感动物试验：

对小鼠和家兔、家鸡有高度致病性，禽源株对鸽有很强的致病性。

瑞氏染色法：

1、组织触片或推片，自然干燥。

2、在接近组织的触片两端用蜡笔划线。

3、在干燥的组织涂片上、在划线的区域内加瑞氏染液染1-3分钟（固定染色），加满划线区勿使染液干。

3、直接滴加与瑞氏染液等量的蒸馏水到涂片上，吹气混匀，继续染3-5分钟，水洗，干燥，镜检（油镜）。

姬姆萨染色：将自然干燥的触片放入甲醇缸中固定3分钟。将固定好的触片放入姬姆萨染液缸中染色15分钟。水洗，干燥，镜检。巴氏杆菌镜下形态：巴氏杆菌镜下图实验安排：

1、每人分别用姬姆萨、瑞氏染色方法染病料触片。

2、每组接种一个鲜血琼脂平皿一个麦康凯琼脂平皿。

3、24小时观察结果。思考题：

1、多杀性巴氏杆菌在纯培养和病料组织中的形态特征有什么差别？检查时各用什么染色方法？通过实验比较吉姆萨和瑞氏染色的特点有那些？

2、多杀性巴氏杆菌的培养特征及生化特性有哪些？

3、试述多杀性巴氏杆菌的微生物学诊断法。****1、涂片染色

2、分离培养3、动物接种病料（疑似巴氏杆菌病的小动物尸体、采集的动物脏器）分离培养接种鲜血平板麦康凯平板涂片染色触片、推心血片瑞氏染色、镜检易感动物接种病料悬液接种注射易感实验动物分离的纯培养物革兰氏染色生化鉴定血清型鉴定PCR组织片中呈两极着色的示病性特征。