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ADMA抗体的制备及ELISA检测方法的建立的开题报告

题目：ADMA抗体的制备及ELISA检测方法的建立

研究背景：

通过前体蛋白质或氨基酸代谢产物检测，可以获取某些疾病的生物标志物。一些疾病也是通过这种方式进行检测和诊断的。Asymmetricdimethylarginine（ADMA）是疾病生物标志物的一个发现。ADMA是一种N-甲基化的精氨酸，它是一种代谢产物，在健康人体内以极低的浓度存在（1.5-0.5μmol/L），但在慢性疾病的患者体内浓度会增加且常状况下作为心血管和糖尿病等疾病的生物标记物而被检测出来。因此，快速和经济有效的检测方法对于有效预防这些疾病具有重要意义。

研究内容：

本研究旨在制备ADMA抗体，并建立ADMAELISA检测方法。具体研究内容如下：

1）ADMA抗原的制备。通过化学合成ADMA抗原，再通过免疫小鼠获得ADMA抗体。

2）制备ADMA酶标板。将ADMA通过特定方法分别固定于小孔板中的孔中；

3）建立ELISA检测方法。首先对ADMA样品和抗体进行预处理，然后将预处理后的ADMA样品加入ADMA酶标板，等待特定时间后洗涤孔板，添加预处理后的ADMA抗体，等待特定时间后再次洗涤孔板，最后添加显色剂和底物溶液，并且读取吸光度。

预期成果：

1）制备出满足质量要求的ADMA抗体和用于ELISA检测的ADMA酶标板；

2）建立一种可靠、准确、快速、实用的适用于临床实验室的ADMAELISA检测方法。

参考文献：

1）AlvingK,MagoulopoulouA,etal.Asymmetricdimethylarginineandmorbidobesityinadolescentsandyoungadults:effectsofweightlossandnormalizationofoxidativestress[J].NutritionDiabetes,2015,5.

2）HébertCR,DaigneaultMC,etal.Asymmetricdimethylarginine,relatedarginineanalogs,andtotalhomocysteineingestationaldiabetes[J].InternationalJournalofEndocrinology,2014,2014.

3）LuTM,ChungMY,etal.Asymmetricdimethylarginineandclinicaloutcomesinchronickidneydisease[J].ClinicalJournaloftheAmericanSocietyofNephrology,2011,6(7):1566-1572.