微生物工程第三章发酵工业培养基设计.ppt

四、水对于发酵工厂，洁净、恒定的水源至关重要。水源质量的主要考虑参数：pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。对于酿造行业，水的重要性不言而喻。对于常规发酵，也需要可靠、持久，能提供大量成分一致清洁的水。第三十页，共73页五、生长调节物质从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。1、生长因子有机氮源是这些生长因子的重要来源第三十一页，共73页概念：指加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大提高的一类化合物。2、前体青霉素：分子量356苯乙酸:分子量136第三十二页，共73页作用：前体有助于提高产量和组份用量：按分子量衡算（考虑转化率）例：6000单位/ml的青霉素G,需要多少苯乙酸？青霉素=6000*0.6（微克）=36mg/ml苯乙酸=（36*136）/356=13.8mg/ml=1.38%实际使用时的转化率在46-90%之间例某厂单耗为：0.337（kg/10亿青霉素）转化率为：0.6/(0.337*36/13.8)=68%第三十三页，共73页用法：前体使用时普遍采用流加的方法前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利例：苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07%流加也有利于提高前体的转化率前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化；第三十四页，共73页指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。3、产物促进剂第三十五页，共73页促进剂提高产量的可能机制：本身是酶的诱导物；是表面活性剂；对酶的表面失活有保护作用；是沉淀或螯合有害的重金属离子。第三十六页，共73页第三节微生物的培养基类型培养基可按其组成物质的纯度、状态、用途分类一、按纯度合成培养基:原料其化学成分明确、稳定适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律培养基营养单一，价格较高，不适合用于工业生产天然培养基:采用天然原料原料来源丰富、价格低廉、适于工业生产原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性第三十七页，共73页M培养基(1L)：Na2HPO46g，KH2PO43g，NaCl0.5g，NH4Cl1g，MgSO4.7H2O0.5g，CaCl20.011g，葡萄糖2-10g,pH7.0YPS培养基：酪蛋白胨（日本大五营养）10g，酵母提取物（英国Oxoid）5g,NaCl10g，pH7.2培养大肠杆菌常用两种培养基第三十八页，共73页二、按状态固体培养基:适合于菌种和孢子的培养和保存，也广泛应用于有子实体的真菌类，如香菇、白木耳等的生产。半固体培养基:即在配好的液体培养基中加入少量的琼脂，一般用量为0.5%～0.8%,主要用于微生物的鉴定。液体培养基:80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分，是发酵工业大规模使用的培养基。第三十九页，共73页斜面培养基种子培养基发酵培养基三、按用途（从发酵生产应用考虑）可分为：第四十页，共73页要求：能使菌体生长快，产生孢子数量大、质量好，且不会引起菌种变异。对放线菌或霉菌产孢子培养基：C、N源不宜多，否则只长菌丝，少长或不长孢子；无机盐浓度要适当控制，否则会影响孢子的颜色和孢子量。1.斜面培养基第四十一页，共73页要求营养丰富、完全，氮和维生素的含量高些；培养基中加入一些易于吸收利用的快C、N源，便于孢子萌发生长；pH要稳定；最后一级尽可能接近发酵培养基，常加入少量发酵合成期才大量需要的物质。2.种子培养基第四十二页，共73页目的：获得高产量的发酵产物。要求：营养丰富完全，有利于产物合成；不能大量加入快C、N源，应和慢C、N源相结合；在产物分泌期间，pH稳定；加入适量合成所需的前体等物质，定向发酵；采用中间补料，以提高发酵单位；原料的考虑——成本问题。3.发酵培养基第四十三页，共73页第四节发酵培养基的设计原理与优化方法培养基设计的重要性：对现存发酵培养基引用吸收的必要验证；对菌种发酵条件认识的必需途径；发酵技术建立的一个重要步骤；发酵生产成本控制的重要渠道。第四十四页，共73页一、发酵培养基的设计原理确定培养基的组成成分确定各组分之间的最佳配比设计目的：第四十五页，共