《鸡马立克氏病诊断技术gbt+18643-2021》详细解读.pptx

《鸡马立克氏病诊断技术gb/t18643-2021》详细解读

contents目录1范围2缩略语3临床诊断4病毒分离5琼脂免疫扩散试验检测6PCR检测

contents目录7荧光定量PCR(q-PCR)检测8综合判定附录A(规范性附录)病毒分离用溶液配制附录B(规范性附录)琼脂免疫扩散试验用溶液配制附录C(规范性附录)PCR检测用引物、反应条件及溶液配制

contents目录附录D(规范性附录)q-PCR检测用引物、探针和反应条件

011范围

本标准适用于鸡马立克氏病的诊断，其他禽类可参照执行。标准适用的动物种类

本标准规定了鸡马立克氏病的诊断原则、诊断方法、病原学检测、血清学检测和病理学检测等方面的内容。标准的诊断内容范围

本标准为鸡马立克氏病的诊断提供了科学、准确的方法，有助于及时发现和控制病情，保障养禽业的健康发展。标准的作用和意义

本标准适用于养禽场、兽医诊疗机构、动物疫病预防控制机构等开展鸡马立克氏病的诊断工作。同时，也可作为相关科研、教学等工作的参考。标准的适用场景

022缩略语

马立克氏病（MareksDisease）的缩写。MD是鸡的一种高度接触性、致瘤性传染病，以淋巴组织增生和肿瘤形成为特征。定义解释MD

定义马立克氏病毒（MareksDiseaseVirus）的缩写。解释MDV是引起鸡马立克氏病的病原体，属于疱疹病毒科，具有致瘤性。MDV

PPV定义禽痘病毒（PoultryPoxVirus）的缩写，与MDV无直接关联，但有时会在相关文献中提及。解释PPV主要引起禽类的皮肤和黏膜痘疹，与MD的某些症状可能相似，但病原和发病机制不同。

酶联免疫吸附测定（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay）的缩写。ELISA是一种常用的血清学检测方法，用于检测MDV抗体或抗原，具有高灵敏度和特异性。ELISA解释定义

聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）的缩写。定义PCR是一种分子生物学技术，可用于MDV核酸的检测和定量分析，具有高度的敏感性和特异性。常用于病原鉴定、疾病诊断和流行病学调查等。解释PCR

033临床诊断

观察鸡群整体状况注意鸡群是否出现精神沉郁、食欲减退、羽毛蓬乱等异常现象。检查运动系统仔细观察鸡只是否出现站立不稳、行走困难、腿部麻痹等神经症状。评估呼吸系统留意鸡只有无呼吸困难、喘息或咳嗽等呼吸道症状。3.1临床症状观察

对疑似病例进行剖检，重点检查外周神经、内脏器官（如肝、脾、肾等）以及皮肤等组织是否存在特征性病变。剖检病变组织采集病变组织样本进行组织学检查，观察是否存在马立克氏病病毒引起的特征性病理变化，如肿瘤细胞浸润等。组织学检查3.2病理学诊断

病原学检测采用病毒分离鉴定、PCR扩增等技术手段，检测样品中是否存在马立克氏病病毒核酸或病毒粒子。血清学检测通过酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法，检测鸡只血清中马立克氏病病毒特异性抗体水平，以辅助诊断。3.3实验室诊断

综合判定结合临床症状、病理学诊断和实验室检测结果，进行综合分析与判定，确定鸡只是否感染马立克氏病。诊断报告出具详细的诊断报告，包括诊断结果、检测方法及依据等，为养殖场提供科学有效的防控建议。3.4诊断结果判定与报告

044病毒分离

通过特定的抗体与病毒表面的抗原结合，从而将病毒从病鸡样本中分离出来。利用特异性抗体捕获病毒将分离出的病毒接种到敏感的细胞系上，使病毒在细胞内增殖，便于后续的检测和鉴定。细胞培养法增殖病毒病毒分离的原理

分离病毒当细胞出现典型病变时，通过特定的方法将病毒从细胞中分离出来，如离心、过滤等。观察细胞病变持续观察细胞的生长情况，记录是否出现典型的鸡马立克氏病病毒引起的细胞病变。接种细胞将处理后的样本接种到已培养好的敏感细胞上，如鸡胚成纤维细胞。采集病鸡样本选择疑似感染鸡马立克氏病的病鸡，采集其血液、羽毛、内脏等样本。处理样本对采集的样本进行适当的处理，如研磨、稀释等，以释放其中的病毒。病毒分离的操作步骤

03控制实验条件实验过程中的温度、湿度、pH值等条件都会影响病毒的增殖和分离效果，因此必须严格控制这些条件。01严格无菌操作整个病毒分离过程必须在无菌条件下进行，以避免其他微生物的污染。02选择适当的细胞系不同的病毒对细胞的敏感性不同，因此必须选择对鸡马立克氏病病毒敏感的细胞系进行分离。病毒分离的注意事项

确诊疾病通过病毒分离可以确诊鸡马立克氏病，为后续的治疗和预防提供准确的依据。病毒学特性研究分离出的病毒可用于深入研究其生物学特性，如病毒的形态、结构、复制方式等。制备疫苗利用分离出的病毒可以制备疫苗，为预防鸡马立克氏病提供有效的手段。病毒分离的意义

055琼脂免疫扩散试验检测

0102试验原理