(19)--3.8 茎的培养植物组织培养.ppt

植物茎培养

目录2.茎培养的方法1.茎培养的意义3.影响茎培养的因素

一、茎培养的意义1.快速繁殖2.固定杂种优势3.脱毒4.种质保存5.科研上的价值第二节植物茎培养

（一）茎尖培养1.概念：切取茎的先端或茎尖分生组织进行无菌培养。2.类型：根据培养目的和取材大小分为：微茎尖培养：指对带有1-2个叶原基的生长锥，其长度一般不超过0.5mm，进行的培养。特点：可获无病毒苗，操作困难，成苗时间长。普通茎尖培养：对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养。特点：操作技术简单、易成活、成苗时间短、繁殖速度快。二、茎培养的方法

普通茎尖指几毫米到几十毫米的芽尖及侧芽微茎尖为0.3-0.5mm

取材材料处理及消毒培养茎尖培养的方法接种驯化移栽

①直接取材：在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。②从试管苗获取。1、取材取1-2㎝顶梢

①顶梢切割成0.5-1.0cm的茎尖（除叶,剥去休眠芽的鳞片）②茎尖流水冲洗2-4h③75%酒精迅速漂洗30s④0.1%升汞或稀释20倍的次氯酸钠液消毒5-8min(取自老枝条上的可适当延长时间）⑤无菌水冲洗3-5次。2、材料处理及消毒

接前可再剥去一些叶片。然后随切随接，动作迅速。亦可将切下茎尖材料在1-5%VC液中浸一下。3、接种用于快速繁殖的茎尖材料，一般比用于脱毒的茎尖组织要大。可带2～4个叶原基或更多，经消毒后剥离的茎尖及时转入到培养基中

(1)培养基①基本培养基：MS、White、B5。②蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。③激素和有机添加物有明显影响。但激素浓度不要太高。4、培养

(2)培养条件①光强：1000－3000lx；光照时间：16h。②温度：25℃左右③昼夜温差有或无，以植物或培养过程来定④干燥季节注意保湿。4、培养

（二）茎段的培养含义：带有一个以上腋(侧)芽或叶柄、长几厘米的茎节段进行离体培养（快繁）

茎段培养过程健康植株上选健壮的枝梢去叶片用自来水冲洗再生培养MS培养基75%酒精0.5分钟1%次氯酸钠0.1%升汞

1、材料选择与处理嫩枝去叶，剪成3-4cm长水冲洗1-3h,75%酒精30-60s，0.1%升汞3-8min(饱和漂白粉液10-20min)无菌水冲洗3-5次。注：生长期取芽，外植体取枝条顶部或中部茎段。

2、接种与培养在无菌条件下，剪去消毒后茎段两端被消毒剂杀伤的部位，将茎段切成单芽小段，竖插到培养基上。若是鳞茎，将鳞茎切成小块，使每块小鳞茎上都带有腋芽，然后接种到培养基上。培养:光强：1000－3000lx；光照时间：16h。温度：25℃左右

蝴蝶兰腋芽萌发

1．基因型2．外值体的大小3．供试植株的生理状态4．芽在植株上的部位5．供试植株的年龄6.培养基7.光照和温度三、影响茎培养的因素

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