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代谢物的测定-理论知识部分

一．相关定义与前言

药物进入体内后一般需经历物理变化和化学变化,物理变化是指药物与生物

大分子如血浆蛋白的结合反应；化学变化是指体内代谢反应。

体内代谢反应也称生物转化，分为一相代谢和二相代谢，一相代谢是指药物

在体内发生的氧化反应、还原反应、水解反应。二相代谢是指药物在体内的结合

反应，包括：葡萄糖醛酸结合、硫酸酯化、甲基化、乙酰基化、氨基酸缀合、谷

胱甘肽缀合等。

体内药物及其代谢产物的分析研究将为药浓度、药效和毒性之间的关系，为

药物作用机理及药代动力学的研究提供科学的依据，因此近年来的进展令人瞩

目，已成为药物研究的重要分支，并形成了一门新型的学科。

1.1本节有关定义

生物利用度(Bioavailability)：剂型中的药物被吸收进入血液的速率和程度。

生物等效性(Bioequivalence)：一种药物的不同制剂在相同的试验条件下，给以

相同的剂量，反映其吸收速率和程度的主要动力学参数没有明显的统计学差异。

二．研究代谢物测定的意义

2.1测定药物及其代谢物在血液组织及脏器内的分布量，是衡量药物的有效性和

安全性的重要指标；

2.2测定药物及其代谢物浓度的经时变化，提供可靠的药代动力学数据；

2.3研究药物的代谢途径，代谢物的药理活性，生成与消除速度，对于合理用药，

避免药物的毒性以及寻找新药有一定意义。

2.4有利于生物样品的保存当生物样品如血液采集之后，血浆酯酶有可能继续

水解样品中的酯类药物，其他酶类也可能对样品药物继续产生代谢反应，因此，

常需加入酶抑制剂。

2.5有利于分析方法选择大多数药物的体内代谢反应，只是药物分子结构上

某些基团的改变，使代谢物与母体药物的化学结构十分相似，从而导致某些物理

性质无较大差异，光谱分析及免疫分析法经常面临代谢物的干扰，欲测定生物样

品中的药物和代谢物含量时，应用色谱法是适当的选择，因其具备分离、分析功

能，能避开代谢物的干扰或直接测定代谢物。

2.6有利于选择样品分离、提取的方法药物经体内代谢后，生成的代谢物一

般极性增大，水溶性增强，因此将药物自生物样品中分离、提取时，常利用它们

之间极性和离解行为为的差别，选择适当pH的缓冲液和溶剂系统将其分开。

三．体内代谢物需要被测定的情况

3.1在做药物的1期临床药代动力学试验时，

3.1.1如果已知有活性代谢物（药理和毒理），并且浓度足够高，可以测定

a）研究的是其药代情况，需要测定代谢物

b）仅仅做生物等效性实验，并且原药可以测定时可以不测定代谢产物

3.1.2如果已知有活性代谢物，但是浓度低，不易测定，可以不测定

3.1.3如果代谢产物会影响药物的代谢，分布和排泄时，在研究其药代特征时应

该考虑进行代谢产物测定

但是代谢产物是否在人体具有活性很难判断，因为其是否有活性均是由其临

床前资料支持的。这时候可以参考05年3月版的《化学药物临床药代动力学研

究技术指导原则》和FDA的《BioavailabilityandBioequivalenceStudiesfor

OrallyAdministeredDrugProducts-GeneralConsiderations》（2003年）

3.2在对生物样品中代谢物浓度的检测时，

3.2.1代谢物能影响药物的安全性和有效性时:

药代动力学研究:同时测定母体药物和代谢物的浓度，

等效性试验:同时测定母体药物和代谢物的浓度,等效性评价时以母体药物作

为主要判断指标。

3.2.2主要代谢物活性不清楚时:

药代动力学研究:测定母体药物和代谢物浓度，

等效性试验:测定母体药物浓度。

3.2.3前药浓度很低,代谢物为体内主要存在形式时:

药代动力学研究:测定母体药物和代谢物浓度，

等效性评价:测定代谢物的浓度。

3.2.4前体药物:

药代动力学研究:测定母体药物(如果能测到)和代谢物浓度，

等效性试验:测定代谢物浓度。

四．代谢物测定时常用的生物样本

代谢物测定时常用的生物样本血样（血浆、血清和全血）、尿样、唾液。

常用生物样本的采集与储存：血浆——全血加抗凝剂，离心，取上清液；血

清——全血离心，取上清液