2022年高考生物高频考点必刷题 基因工程.docxVIP

2022年高考生物总复习高频考点

基因工程

1．用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位

点如图所示。

回答下列问题：

(1)常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中__________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接。上图中___________酶切割

后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。

(2)DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是

____________。

(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA份子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能___________；质粒DNA份子上有______________，便于外源DNA插入；质粒DNA份子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因)，利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是

______________。

(4)表达载体含有启动子，启动子是指__________________。

【答案】EcoRI、PstIEcoRI、PstI、SmaI和EcoRV磷酸二酯键自

我复制一至多个限制酶切位点用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，

能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞位于基因首端的一段特殊DNA序

列，是RNA聚合酶识别及结合的部位，能驱动转录过程

【分析】

基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。

【详解】

(1)限制酶EcoRI和PstI切割形成的是黏性末端，限制酶SmaI和EcoRV切割

测氨基酸序列功能

形成的是平末端，E.coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低。因此图中EcoRI和PstI切割后的DNA片段(黏性末端)可以用E.coliDNA连接酶连接，除了这两种限制酶切割的DNA片段，限制酶SmaI和EcoRV切割后的DNA片段(平末端)也可以用

TDNA连接酶连接。

4

(2)DNA连接酶将两个DNA片段连接形成磷酸二酯键。

(3)质粒是小型环状的DNA份子，常作为基因表达的载体，首先质粒上含有复制原点，能保证质粒在受体细胞中自我复制。质粒DNA份子上有一个至多个限制性核酸内切酶的酶切位点，便于目的基因的导入。质粒上的标记基因是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，具体做法是用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞。

(4)启动子是一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才干驱动基因转录出mRNA，最终获得需要的蛋白质。2．已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P份子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)非但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：

(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的__________进行改造。

(2)以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰________基因或者合成_____基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括___________的复制；以及遗传信息在不同份子之间的流动，即：____________。 (3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过___________和_____________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，在经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物________进行鉴定。

【答案】氨基酸序列(或者结构)PP1DNA和RNADNA→RNA、

RNA→DNA、RNA→蛋白质(或者转录、逆转录、翻译)设计蛋白质结构推

【分析】

蛋白质工程原理：中心法则逆推；

蛋白质工程过程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→猜测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质。

蛋白质工程实质