病毒的鸡胚接种技术.pptVIP

目录1.实训目的2.实训原理3.实训材料4.实训操作5.实训应用1.实训目的掌握鸡胚尿囊腔接种方法掌握鸡胚尿囊液收获方法2.实训原理病毒是非细胞型微生物，不能在无生命培养基中培养，必须借助动物、禽胚、动物细胞等才能增殖；部分动物病毒（尤其是禽源病毒）可在禽胚中大量增殖，并致死或致弱禽胚，在胚液、胚膜、胚体中分布有大量病毒并可进行分离收获；通过观察接种后禽胚的活力变化，确定病毒收获时机。3.实训材料试验用病毒和鸡胚鸡新城疫活疫苗（LaSota株）病毒悬液、9～11日龄鸡胚3.实训材料病毒接种所需器材超净工作台、照蛋器、蛋架、铅笔、2.5%碘酊棉、75%酒精棉、酒精灯、钻孔钢锥、1mL注射器、石蜡、镊子、废物缸等3.实训材料病毒培养和收获所需器材超净工作台、温箱、照蛋器、蛋架、2.5%碘酊棉、75%酒精棉、酒精灯、镊子、灭菌吸管、灭菌青霉素瓶、废物缸等4.实训操作鸡胚的选择和准备病毒接种鸡胚孵育与观察收获含毒尿囊液废弃物处理4.实训操作注意事项（1）无菌操作；此处截取实验操作中的短视频或画面1.病毒接种前鸡胚接种部位的消毒2.病毒尿囊液收获时鸡胚气室的消毒3.镊子撕破绒毛尿囊膜前火焰灼烧灭菌4.实训操作注意事项（2）打孔要稳，以手腕作为支点垂直发力，穿破蛋壳即可。力度不宜过大，防止刺穿壳膜；钢锥要垂直于接种部位，防止其在蛋壳表面打滑伤手；此处截取实验操作中的打孔短视频4.实训操作注意事项（3）病毒接种要缓慢；此处截取实验操作中病毒接种短视频4.实训操作注意事项（4）18h内死亡鸡胚弃去不用；死亡鸡胚4.实训操作注意事项（5）收获的病毒材料需做无菌检验。尿囊液无菌检验5.实训应用（1）病毒分离鉴定：收获的鸡胚尿囊液中含有大量病毒，可以血凝抑制试验等对其进行进一步鉴定。鸡胚尿囊液5.实训应用（2）生产疫苗及诊断抗原：部分病毒仍以禽胚作为增殖病毒的主要载体，生产禽胚苗和诊断抗原，如新城疫病毒、流感病毒等。用SPF鸡胚生产出的鸡新城疫活疫苗THANKS