实验紫外分光光光度计测定水体中的硝态氮.pdf

实验一紫外分光光度法测定体中的硝态氮

一、实验目的

1.认识天然体中无机态氮的形态；

2.掌握紫外分光光度计的结构和用途；

3.掌握紫外分光光度法测定硝酸盐氮的技术原理及方法；

4.熟悉回收率的含义及测定方法。

二、实验要求

根据紫外分光光度法测定体中硝态氮的原理和方法，利用实验室可提供的

试剂、仪器和材料，选择最合理的方案（仪器、试剂、步骤等），寻找最合理的答

案，完成列任务，回答有关问题，并最终独立完成实验。实验室可提供的试剂和

仪器见表3-30。

表3-30实验室可提供的试剂和仪器

硝酸钾；硝酸钠；亚硝酸钠；浓硝酸(密度1.4mg·L-1，浓度65%)；盐酸；氨

试剂

基磺酸

烧杯（各种规格）；玻棒；容量瓶（各种规格）；分析天平；台秤；称量瓶；

仪器

量筒（各种规格）；滴管；吸耳球；移液管（各种规格）；吸量管（各种规

和材

格）；比色管；可见分光光度计；紫外分光光度计、红外分光光度计、原子吸

料

收分光光度计等

三实验原理

1.无机态氮的形态及关系

氨氮、硝酸盐氮、亚硝酸盐氮互相转换。

问题1无机态氮有哪几种形态？

任务1写出无机态氮形态之间的相互关系。

2.硝酸根离子的结构特征

就硝酸盐而言，NO3-离子呈平面三角形结构（见图3-5），

硝酸根中存在三个NOσ键，同时存在一个

离域键，在紫外区域能够发生电子跃迁，而吸收紫外辐

射，形成紫外吸收光谱。

图3-5硝酸根离子结

实验原理：本实验采用不经显色反应，利用硝酸根离子在

构示意图

200nm波长有最大吸收的原理直接测定。

3.紫外分光光度计及测定原理：

（1）构造：主要由辐射源(光源)、色散系统、检测系统、吸收池、数据处理

机、自动记录器及显示器等部件组成。

波长范围：190nm～900nm（200～400nm的紫外光区、400～900nm的可见光

区）

（2）紫外分光光度法的使用

定性分析方法：测得标准物质的吸收峰以及其对应波长值（同时可获得该物

质的最大吸收波长）；即最佳测定波长；

定量分析：在最佳波长处，分别以（不同浓度）标准溶液的吸光度和溶液浓

度为横、纵坐标绘出化合物溶液的标准曲线得到其所对应的数学方程。

任务2写出紫外分光光度计的主要部件及各部件的功能。

任务3描述紫外分光光度计的主要用途。

任务4描述紫外分光光度法定量分析依据和定量分析方法。

四、实验内容

1.试剂配制

1.11000μg?mL-1NO3-标准储备液的配制

任务5写出本溶液配制流程

任务6指出配制流程中所用的称量仪器以及体积控制仪器名称。

1.210μg?mL-1NO3-标准使用液的配制

任务7写出本溶液配制流程

任务8指出配制流程中所用的体积测量仪器或体积控制仪器名称。

1.31mol·L-1HCl溶液

任务9写出本溶液配制流程.

问题2为什么要配置盐酸，作用是什么？

2.吸收光谱/吸收曲线的制作及摩尔吸光系数的测定

选择任意两个浓度的硝酸盐溶液，按照下面表格测定吸光度。记录下表3-

31。

###硝酸离子（NO3-）吸收曲线分析

（1）桌面UV-P双击，打开界面——点击connect;

（2）扫描波长，点击“spectrum”——method——界面，设定扫描范围

180-300nm，保存方法——确定；

（3）先扫描基线：1ｃｍ石英比色皿装两个超纯水，——baseline——扫完

后-点击peakpick;

(4)扫描硝酸根离子样品波长：外面的比色皿换成标准样品，点击start——

dateplint_所有数据扫描，所有数据显示，记录最佳波长λmax（约为200nm