植物细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒产品说明书中文版.pdfVIP

植物细色素C氧化酶活性测定试剂盒产品说明书（中文版）

主要用途

植物细胞色素C氧化酶活性测定试剂是一种旨在通过细胞色素C氧化酶反应系统中还

原性细胞色素C氧化后吸光峰值的降低，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的

技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种植物组织，包括种子

（seed）、叶片（leaf）、根（root）等裂解悬液中细胞色素C氧化酶的活性检测。产品不

含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。

技术背景

细胞色素C氧化酶（Cytochromecoxidase）存在于真核生物的细胞线粒体上（包

括植物细胞），主要通过氧化磷酸化为细胞提供能量。基于底物还原型细胞色素C（reduced

cytochromec），受到细胞色素C氧化酶的催化，转化为氧化型细胞色素C（oxidized

c

cytochrome），在分光光度仪，出现吸光值的变化（550nm波长），由此定量测定细

胞色素C氧化酶的活性。细胞色素C氧化酶反应系统为：

产品内容

清理液（ReagentA）毫升

裂解液（ReagentB）毫升

1

缓冲液（ReagentC）毫升

反应液（ReagentD）毫升

稳定液（ReagentE）微升

稀释液（ReagentF）微升

产品说明书1份

保存方式

保存清理液（ReagentA）和缓冲液（ReagentC）在4℃冰箱里，其余的保存在

－20℃冰箱里；反应液（ReagentD）避免光照；有效保证6月

用户自备

15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器

1.5毫升离心管：用于样品制备和保存的容器

DOUNCE匀浆器：用于组织匀化

微型台式离心机：用于样品制备

培养箱：用于反应育

2

比色皿：用于比色分析的容器

分光光度仪：用于比色分析

实验步骤

一、样品准备

1．准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定1克组织重量

2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管

3．（选择步骤）加入xx毫升清理液（ReagentA）清洗1次

4．即刻用刀片切碎组织

5．放进一个预冷的15毫升锥形离心管

6．加入预冷的xx毫升裂解液（ReagentB）

7．涡旋震荡5秒，充分混匀

8．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用研磨棒匀化组织（约80）

9．将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管，放进4℃微型台式离心机离心10分钟，

速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf5415）

3

10．小心移出上清液（注意：不要触碰沉淀物）到另一个新的预冷的15毫升锥形离

心管

11．（选择步骤）如果上清液含有肉眼可见的残渣，重复离心5分钟一次，速度为

5000g（或7500RPM，例如eppendorf5415）

12．即刻移入到1.5毫升离心管

13．移取10微升进行蛋白定量检测（注意