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实验室常用缓冲液配置方案
1)1MTri-HCl(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度:1MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
1.121.1gTris1L
称量置于烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.pH
按下表量加入浓盐酸调节所需要的值。
PH浓HCl
值
7.4约70ml
7.6约60ml
8.0约42ml
4.1L
将溶液定容至。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很,温度每升高1℃,
溶液的pH值约降低0.03个单位。
2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)
组份浓度:100mMTris-HCl,10mMEDTA
配制量:1L
配制方法:
1.1L
量取下列溶液,置于烧杯中。
1MTris-HClBuffer100ml
(PH7.4,7.6,8.0)
500mMEDTA(PH8.0)20ml
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。
3.1L
将溶液定容至后,高温高压灭菌。
4.室温保存。
3)1.5MTri-HCl(pH8.8)
组份浓度:1.5MTris-HCl
配制量:1L
配制方法:
1.181.7gTris1L
称量置于烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.pH8.8
用浓盐酸调节值至。
4.1L
将溶液定容至。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很,温度每升高1℃,
溶液的pH值约降低0.03个单位。
4)3M醋酸钠(pH5.2)
组份浓度:3M醋酸钠
配制量:100ml
配制方法:
1.称量40.8gNaAc·3HO置于100-200ml烧杯中,加入月40ml的去离子搅拌溶解
2
2.pH5.2
加入冰醋酸调节值至
3.加去离子水将溶液定容至100ml
4高温高压灭菌后,室温保存。
5)PBSBuffer
组份浓度:137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4
配制量:1L
配制方法:
1.1L
称量下列试剂,置于烧杯中。
NaC8g
l
KCl0.2g
Na21.42g
HPO
4
KH20.27g
PO4
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.pH7.41L
滴加浓盐酸将值调节至,然后加入去离子将溶液定容至。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBSBuffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。
6)10M醋酸铵
组份浓度:10M醋酸铵
配制量:100ml
配制方法:
1.77.1g100200ml30ml
称量醋酸铵置于~烧杯中,加入约的去离子搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100ml。
3.使用0.22mm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶口于室温保存。
注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。
苯酚氯仿异戊醇
7)//(25:24:1)
配制方法:
1.//25:2
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