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EZH2基因对宫颈癌预后的影响及调控宫颈癌CaSki细胞株增殖的研究的开题报告

一、问题背景与意义

宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，全球每年约有50多万人死于宫颈癌。在我国，宫颈癌是妇女癌症中的第二大杀手，其发病率和死亡率一直位居较高水平。EZH2是一种在染色质重塑和表观遗传学调控中的关键调节因子，在多种癌症中的作用已被广泛研究，但EZH2在宫颈癌中的作用和调控机制尚未得到充分阐明。

二、研究目的和内容

本研究旨在探究EZH2基因对宫颈癌预后的影响和调控宫颈癌CaSki细胞株增殖的机制。具体包括以下内容：

1.分析EZ2H基因在宫颈癌组织中的表达情况，并探究其与宫颈癌病理特征和预后的关系。

2.利用CRISPR-Cas9技术构建EZH2基因敲除的CaSki细胞株，研究EZH2基因对CaSki细胞增殖和细胞周期的调控作用。

3.探究EZH2基因调控宫颈癌CaSki细胞增殖的分子机制，寻找EZH2基因调控的上游和下游的关键分子，推测EZH2基因调控的信号转导通路。

三、研究方法

1.实验样本：收集宫颈癌组织和正常组织标本，提取样本中的总RNA，并采用qRT-PCR和Westernblot分析EZH2基因的表达情况和水平。

2.细胞实验：利用CRISPR-Cas9技术构建EZH2基因敲除的CaSki细胞株，并分别测定EZH2敲除和野生型对CaSki细胞增殖和细胞周期的影响。并进一步研究EZH2基因调控的上游和下游的关键分子。

3.信号转导实验：根据EZH2基因调控的上游和下游基因的预测结果，进行信号转导分析，预测EZH2基因调控的底层信号转导通路。

四、研究成果预期

1.探究EZH2基因对宫颈癌预后的影响和宫颈癌CaSki细胞株增殖的调控机制，确定EZH2基因在宫颈癌中的重要作用。

2.揭示EZH2基因调控的关键分子和信号转导通路，为宫颈癌的治疗和预防提供了理论基础和实验依据。

3.为发掘新型治疗宫颈癌的分子标靶提供了新思路，并对癌症治疗、表观遗传学和基因工程等领域的研究提供了参考和借鉴。