mRNA差异显示技术.pptVIP

mRNA差异显示技术;;一.概述：mRNA差异显示技术;mRNA差异显示PCR技术是1992年由美国波斯顿Dena-Faber癌症研究所的LiangPeng博士和ArthurPardee博士建立起来的一种用于鉴定和克隆哺乳动物正常生理状态和异常状态细胞之间差异表达基因的方法,是目前筛选差异表达基因最有效的方法,同时，研究mRNA差异相对于研究DNA差异而言。它排出了非编码区〔内含子〕的影响，从而使得研究结果更加接近于真实。;二.DDRT-PCR的创造及其根底;三、mRNA差异显示技术的原理：;5’;四.DDRT-PCR目前的应用领域;五.DDRT-PCR一般操作步骤;mRNA差异显示技术简略流程图;六.DDRT-PCR的优点;七.DDRT-PCR的缺点;八.DDRT-PCR的技术改进;引物设计;反响条件优化;显示方法;假阳性的鉴定;mRNA差异显示技术现在已经成功运用于动物的胚胎发育、组织分化、生长因子激活与抑制、细胞周期控制、癌变及疾病相关基因的鉴定和克隆，在植物无性繁殖、形态发生、次生代谢、抗逆抗病等方面被用来进行基因的鉴定、克隆以及功能研究，并取得很好的结果。概括起来其主要用途可以归纳为以下三点：

第一，寻找差异表达的基因。

第二，研究个体、种群或品种间转录水平上的遗传变异。

第三，鉴定经济动物中控制重要数量经济性状位点的基因。

;由于人们认识的基因还不够全面，特别是对生物发生、发育及病理生理过程中某些新的功能基因和调控作用认识缺乏，因此差异显示技术将在研究生物进化、损伤修复、癌变及治疗反响过程中具有重要意义。差显技术的发现为在该领域中寻找新基因提供了有用的工具。相信随着不断的应用和技术的不断改善，差异显示技术必越来越多的在生命科学以及医学领域的基因鉴定、克隆等方面起到更大的作用，对揭示生物界基因表达调控的奥秘将起重要作用。

经过近几年的研究，在提高重复性，降低假阳性方面有所改进，尤其mRNA差异显示试剂盒的商品化，为mRNA差异显示提供了成套试剂，mRNA差异显示技术将会越来越广泛的应用于生命科学的研究。对进一步揭开基因表达调控的奥秘，将发挥越来越大的作用。;