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DNA复制的起点与方向

曲良焕

华中农业大学

1.复制起点

(Replicationorigin)

1.1大肠杆菌复制起

点(oriC)的分离

1.2复制起点的特征

J.W.Zyskind:确定E.colioriC其最小区段为245bp,

5种细菌的oriC序列进行比较分析发现,

富含AT,DNA聚合酶(DnaA)结合位点

oriC

1.3呼吸现象

DNA复制原点处氢键迅速断裂与再生,导致两条DNA

链不断解链与聚合,形成瞬间的单泡状结构的过程

在富含AT的区域内尤为明显

1.4复制起点两侧基因的转导频率高

aob

复制的不同步性

caobd

断裂的随机性

ecaobdf

gecaobdfh

多数rDNA位于该区域!

4a4b

3c3d

2e2f

1g1h

replicationorigin

2.复制的方向

单起点、单方向

多起点、单方向

单起点、双方向

多起点、双方向

复制过程的研究

快停突变ts(延伸突变型)(fast-stopmutation)

当温度升高,复制立即停止

慢停突变ts(起始突变型)(slow-stopmutation)

当温度升高至42℃,下一周期开始,复制停止

复制方向的研究(1963,J.Cairns)

E.colithy-slow-stopmut.ts?

复制发动温度敏感突变型42℃

3

37℃,5ci/mMH-T,6min

3

37℃,52ci/mMH-T,6min模式?

42℃,T,onecircle

单起点、双方向

R.L.Rodriguez

E.colithy-slow-stopmut.ts42℃

3

37℃,5ci/mMH-T,20min

3

37℃,52ci/mMH-T,45min

3.子链DNA的延伸方向

•DNA聚合酶只能只能利用3’-OH聚合dNTP

•新生DNA链只能按5’到3’方向进行延伸

TCAC

5’PPPOH+pppOH

进化中保留的

选择与适应的

TCAC

5’PPP

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