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DNA复制的起点与方向
曲良焕
华中农业大学
1.复制起点
(Replicationorigin)
1.1大肠杆菌复制起
点(oriC)的分离
1.2复制起点的特征
J.W.Zyskind:确定E.colioriC其最小区段为245bp,
5种细菌的oriC序列进行比较分析发现,
富含AT,DNA聚合酶(DnaA)结合位点
oriC
1.3呼吸现象
DNA复制原点处氢键迅速断裂与再生,导致两条DNA
链不断解链与聚合,形成瞬间的单泡状结构的过程
在富含AT的区域内尤为明显
1.4复制起点两侧基因的转导频率高
aob
复制的不同步性
caobd
断裂的随机性
ecaobdf
gecaobdfh
多数rDNA位于该区域!
4a4b
3c3d
2e2f
1g1h
replicationorigin
2.复制的方向
单起点、单方向
多起点、单方向
单起点、双方向
多起点、双方向
复制过程的研究
快停突变ts(延伸突变型)(fast-stopmutation)
当温度升高,复制立即停止
慢停突变ts(起始突变型)(slow-stopmutation)
当温度升高至42℃,下一周期开始,复制停止
复制方向的研究(1963,J.Cairns)
E.colithy-slow-stopmut.ts?
复制发动温度敏感突变型42℃
3
37℃,5ci/mMH-T,6min
3
37℃,52ci/mMH-T,6min模式?
42℃,T,onecircle
单起点、双方向
R.L.Rodriguez
E.colithy-slow-stopmut.ts42℃
3
37℃,5ci/mMH-T,20min
3
37℃,52ci/mMH-T,45min
3.子链DNA的延伸方向
•DNA聚合酶只能只能利用3’-OH聚合dNTP
•新生DNA链只能按5’到3’方向进行延伸
TCAC
5’PPPOH+pppOH
进化中保留的
选择与适应的
TCAC
5’PPP
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