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《生物产品的分析与检验技术》

赖氨酸的测定

■赖氨酸(L-Lysine)是人

体必需氨基酸之一，学名为

二氨基己酸，其化学组成为

CHON，相对分子质量为

61422

146.19。具有不对称的α碳

原子，故有L型、D型两种异

构体，DL型赖氨酸是等分子L

型、D型的混合体，其中只有

L-赖氨酸是才能被生物体所

利用，L-赖氨酸也是世界上

仅次于味精的第二大氨基酸

品种。

■L-赖氨酸的化学名称为L-2,6-二氨基己酸或α，ε-二

氨基己酸，属于单斜晶系，熔点为263℃，比旋光度是

+21°，难溶于醇和醚，易溶于水，等电点为9.59。游离的

L-赖氨酸具有很强的呈盐性，极易吸收空气的CO生成碳酸

2

盐，故一般商品是以L-赖氨酸盐酸盐的形式存在。L-赖氨

酸盐酸盐的化学组成为CHONCl或CHON·HCl，其相

6152261422

对分子量为182.64，化学性质稳定，为无色晶体，几乎无

味，易溶于水，难溶于醇和醚，在25℃的水中溶解度为

793g/L。

■赖氨酸是一种碱性氨基酸，是谷物蛋白的第一限制性氨

基酸，在谷物食料中添加适量的赖氨酸，其蛋白质的生物

价大大提高，因此赖氨酸的应用范围很广。据统计全世界

赖氨酸产量的5%左右用于医药工业，约5%用于食品工业，

其余的90%左右用于饲料工业。

■赖氨酸的价格较高，产品品质参差不齐，甚至还有掺假

现象，因此掌握正确的赖氨酸检测方法，不仅可为用户提

供购选产品及计算配方用量的参考，同时也可作为识别假

冒伪劣产品重要的手段和依据。

■检测赖氨酸的方法主要有茚三酮溶液显色法、高效液相

色谱法等

赖氨酸的测定

高效液相色谱法测定赖氨酸含量

1.原理

在碱性条件下，赖氨酸的ε一氨基可与2，4一二硝基

氯苯反应生成二硝基苯赖氨酸衍生物，用高效液相色谱法

分离测定该衍生物，从而求得赖氨酸的含量。

二、高效液相色谱法测定赖氨酸含量

2.试剂与仪器

■赖氨酸标准储备液称取赖氨酸0.2008g，溶于50mL纯

水中，浓度为4.016mg／mL

■c(NaCO)0.4mol／L溶液称取4.3gNaCO固体，溶

2323

于100mL纯水中

■2,4-二硝基氯苯(CDNB)溶液称取2,4一二硝基氯苯(化

学纯)2.0g，溶于100mL甲醇中，浓度为20g／mL

■cHCl0.8mol／L溶液取浓盐酸13mL，加水至200mL

■流动相称取1.4gNaAc•3H2O溶于500mL纯水中，用

冰醋酸调节到pH5.0，加水至1L，此溶液为0.01mol／L

NaAc缓冲溶液。取该溶液750mL，加250mL色谱用甲醇，混

匀后经0.45μm滤膜过滤，超声波水浴脱气30min

二、高效液相色谱法测定赖氨酸含量

3.操作步骤

（2）样品测定准确称取样品0.1g，加水溶解后，定

容于50mL容量瓶中。吸取此溶液0.4mL于15mL玻璃试管

中，加c(Na2CO3)0.4mol／L溶液2mL，CDNB溶液0.2mL，

混匀，置90℃水浴中反应1h。取出冷却至室温，加

CHCl0．8mol／L溶液2mL(中和至中性)，转入25mL容

量瓶中用水定容至刻度，经0.45μm滤膜过滤，按要求设

定色谱工作条件，取20μL样品测定液注入色谱柱内分析。

二、高效液相色谱法测定赖氨酸含量

4.结果计算

样品中赖氨酸含量按下式计算：

式中X——样品中赖氨酸的含量，％

c——从标准曲线上查找的试液中赖氨酸含量，ug

／mL

m——样品质量，g

50——样品溶液的体积，mL

25/0.