3完整版本.4蛋白质工程的原理和应用-2)(公开课示范课优质课精品、经典).pptxVIP

3.4蛋白质工程的原理和应用

生物学选择性必修3

学习目标核心素养1.概述人们根据基因工程原理，进行蛋白质设计和改造，可以获得性状和功能符合人类要求的蛋白质。2．举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。1.生命观念：说明基因的碱基排列顺序—蛋白质的结构—蛋白质功能的关系。2．科学思维：尝试通过蛋白质工程技术，根据人类需要的蛋白质结构，设计改造某一蛋白质的设计流程。3.社会责任——尝试运用逆向思维分析和解决问题。

复杂多样的蛋白质一级结构氨基酸排列顺序二级结构指蛋白质多肽链本身的折叠和盘绕的方式三级结构蛋白质分子处于它的天然折叠状态的三维构象四级结构在体内有许多蛋白质含有2条或2条以上多肽链,才能全面地执行功能。每一条多肽链都有其完完整的三级结构,称为亚基据估计，生物界的蛋白质种类多达1010~1012种思考：蛋白质工程是否直接改造蛋白质？蛋白质的高级结构十分复杂，直接改造难度大；

思考：若让你提供改造蛋白质的思路你认为可以通过什么途径呢？DNARNA肽链转录翻译复制逆转录具有特定空间结构的蛋白质盘曲折叠表达生物特有的功能和性状基因改造的优点：（1）改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。改造蛋白质分子是无法遗传的。（2）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度小得多。

一、蛋白质工程的概念书P93以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求操作对象：结果：与基因工程的关系：改造或合成基因改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程基因工程2.0

二、蛋白质工程崛起的缘由1.基因工程的实质及不足①实质：基因工程是将一种生物的基因转移到另一种生物体内，使后者可以产生它原本不能产生的蛋白质，进而表现出新性状。②不足：基因工程原则上只能生产自然界中已存在（天然）的蛋白质。基因重组【实例1】最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白，科学家通过改造它将绿色荧光蛋白发光基团正下方的第203位的苏氨酸替换为酪氨酸，获得了黄色荧光蛋白等。这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用。通过蛋白质工程可以获得新的蛋白质

二、蛋白质工程崛起的缘由2.天然蛋白质的不足天然蛋白质是生物长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。【实例2】对天然酶的改造玉米中赖氨酸的含量较低，原因是赖氨酸合成过程中的两种关键酶-----天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性，受细胞内赖氨酸浓度的影响较大。二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）天冬氨酸激酶（异亮氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）玉米中赖氨酸含量可提高数倍玉米中赖氨酸含量比较低天冬氨酸激酶（352位的苏氨酸）改造改造

三、蛋白质工程的基本原理——以速效胰岛素类似物研发为例1982年第一个基因工程药物：重组人胰岛素（P95）天然胰岛素制剂存在问题：能不能改造胰岛素的结构，使其不易聚合，且仍然具有胰岛素的功能特性呢？如何解决？容易形成二聚体或六聚体，延缓了疗效。

三、蛋白质工程的基本原理【小资料】天然胰岛素制剂往往以二聚体或六聚体的形式存在，需要经历长时间才能解离为单体，见效慢。科学通过解析人体胰岛素的晶体结构发现，胰岛素β链第20~29位的氨基酸是胰岛素分子形成多聚体的关键区域，将第28位的脯氨酸替换为天冬氨酸或将它与B29位的赖氨酸交换位置，可以有效抑制胰岛素的聚合。请小组讨论改造胰岛素分子的思路。

三、蛋白质工程的基本原理天然蛋白质易形成二聚体或六聚体预期结构改造B28位脯氨酸替换为天冬氨酸或将它与B29位的赖氨酸交换位置新胰岛素基因转录mRNA折叠预期功能行使功能降低胰岛素的聚合作用设计结构改变B链第20-29位氨基酸组成推测序列翻译多肽链有效抑制胰岛素的聚合预期的蛋白质功能出发设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到并改变相应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因 获得所需要的蛋白质基本思路：

如何找到蛋白质的氨基酸序列呢？通过在Genbank数据库（）中搜索更改B28和29位后的蛋白质序列为：FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTKPT正常人胰岛素B链的蛋白质序列为：FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT中文名称单字母符号中文名称单字母符号甘氨酸G苏氨酸T丙氨酸A半胱氨酸C缬氨酸V蛋氨酸M亮氨酸L天冬酰胺N异亮氨酸I谷氨酰胺Q脯氨酸P天冬氨酸D苯丙氨酸F谷氨酸E酪氨酸Y赖氨酸K色氨酸W精氨酸R丝氨酸S组氨酸H↓

怎样得到基因序列？更改B28和29位后的蛋白质序列为