蛋白质的表达、纯化及检测-分子实验报告.docx

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试验目的

了解外源基因在大肠杆菌细胞中的诱导表达状况

学会用SDS-电泳法分别不同分子量的蛋白质

学习通过亲和层析法纯化目的蛋白

学会考马斯亮蓝染色法和蛋白质杂交法检测蛋白质试验原理

外源基因在大肠杆菌细胞中的诱导表达:将外源基因克隆在特别的表达载体中,

让其在E.coli中表达,该表达载体上含有lac操作子的启动子。在不加诱导剂的条件下培育宿主菌,lacI基因表达的阻遏蛋白LacI与lac操作子结合,使外源基因不能表达;向培育基中参加诱导物IPTG后,LacI阻遏蛋白变构失活,不能与lac操作子结合,外源基因就表达。

蛋白质SDS-电泳分别:SDS-是最常用

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