单抗制备过程.docx

动物的选择与免疫

动物的选择：纯种BALB/C小鼠

免疫方案：依据抗原的特性不同而定。

〔1〕可溶性抗原免疫原性较弱，一般要加佐剂，半抗原应先制备免疫原，再加佐剂。

初次免疫抗原1～50μg加福氏完全佐剂皮下多点注射或脾内注射〔一般0.8～1ml,0.2ml/点〕 ↓3周后其次次免疫剂量同上，加福氏不完全佐剂皮下或ip〔腹腔内注射〕〔ip剂量不宜超过0.5ml〕 ↓3周后第三次免疫剂量同一，不加佐剂，ip〔5～7天后采血测其效价〕 ↓2～3周

加强免疫，剂量50～500μg为宜，ip或iv〔静脉内注射〕 ↓3天后取脾融合

目前，用于可溶性抗原〔特别是一些弱抗原〕的免疫方案也不断有所更，如：①将可溶性抗原颗粒化或固相化，一方面增加了抗原的免疫原性，另一方面可降低抗原的使用量。②转变抗原注入的途径，根底免疫可直接承受脾内注射。

③使用细胞因子作为佐剂，提高机体的免疫应答水平，增加免疫细胞对抗原的反响性。细胞融合

〔1〕主要试剂的配制

细胞培育基a、 杂交瘤技术中使用的细胞培育基主要有RPMI-1640或DMEM〔DulbercoModifiedEaglesMedium〕

细胞培育基

两种根底培育基，具体配制方法按厂家规定的程序，配好后过滤除菌〔0.22um〕，分装，4℃保存。

b、氨基喋呤〔A〕贮存液〔100×，4×10-5