蛋白纯化原则和技术介绍.docx

蛋白纯化原则和技术概览

无论是蛋白争论还是应用，通常需要将蛋白利用不同的生物系统表达出来，然后进展分别和纯化。争论试验室通常需要纯化微克或毫克级别的蛋白质，而工业上需要纯化数千克甚至数吨的蛋白质。因此，蛋白纯化格外重要。纯化过程中，主要需要考虑宿主污染、样品的可溶性、蛋白构造的完整性和生物活性。蛋白的纯化可大致分为样品捕获、中度纯化阶段和精细纯化阶段3个阶段。

样品捕获：分别、浓缩和稳定化处理；

中度纯化：去除核酸等其他细胞成分，可使用硫酸铵沉淀法；

精细纯化：将靶蛋白与其他大小及理化性质接近的蛋白区分开来，常用方法包括凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析等。

蛋白纯化指导原则

1