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实验五线粒体和液泡系的
超活染色与观察一实验目的1观察动、植物活细胞内线粒体、液泡的形态、数量和分布2学习一些细胞器的超活染色技术。二实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒的一种染色方法。活体染色可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据染色剂性质和染色方法不同,分为体内活染和体外活染。二实验原理体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内,染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里,达到易于识别的目的。体外活染又称超活染色,它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块,以染料溶液浸染,染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。三实验用品1器材:显微镜、恒温水浴锅、、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸2试剂:Ringer液、1/5000詹纳斯绿B、1/3000中性红3材料:人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞、小麦或黄豆幼根根尖。四实验方法一线粒体的超活染色与观察詹纳斯绿B能专一对线粒体进行超活染色。这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态,即有色状态,呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。1人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色观察
载玻片→37℃水浴锅的金属板→滴两滴詹纳斯绿B染液牙签→从口腔粘膜刮取上皮细胞→放入载玻片染液→染色10-15分钟→盖上盖玻片→观察低倍镜→平展的口腔上皮细胞→高倍镜→颗粒或短棒状线粒体口腔上皮细胞的线粒体分布洋葱鳞茎表皮细胞线粒体的
超活染色载玻片→滴一滴詹纳斯绿B染液→撕取一小片洋葱鳞茎内表皮→染色10-15分钟吸去染液→加一滴Ringer液→盖上盖玻片→观察洋葱内表皮细胞的线粒体分布二液泡系的超活染色与观察中性红对液泡系的染色具有专一性。只将活细胞中的液泡系染成红色,细胞核与细胞质完全不着色。小麦或黄豆幼根根尖细胞液泡系的中性红染色观察双面刀片→小麦或黄豆幼苗根尖→切一纵切面→中性红染色5-10分钟吸去染液→加一滴Ringer液→盖上盖玻片→镊子轻轻下压盖玻片(根尖压扁)→观察小麦或黄豆幼根根尖细胞液泡系的中性红染色观察在高倍镜下,先观察根尖部分的生长点的细胞,可见细胞质中散在很多大小不等的染成玫瑰红色的圆形小泡,这是初生的幼小液泡。然后,由生长点向延长区观察,在一些已分化长大的细胞内,液泡的染色较浅,体积增大,数目变少。在成熟区细胞中,一般只有一个淡红色的巨大液泡,占据细胞的绝大部分,将细胞核挤到细胞一侧贴近细胞壁处。植物根尖液泡的中性红染色
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