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紫外可见分光光度法
UV-VIS
第四节
紫外可见分光光度计
一、紫外可见分光光度计
基本组成
光源单色器样品室检测器显示
1.光源
在整个紫外光区或可见光
谱区可以发射连续光谱,具
有足够的辐射强度较好的
稳定性较长的使用寿命。
可见光区:钨灯作为光源,
其辐射波长范围在320~
2500nm。
紫外区:氢氘灯。发射
150~400nm的连续光谱。
2.单色器
•将光源发射的复合光分解成单色光并可从中
选出一任波长单色光的光学系统。
•包括狭缝、准直镜、色散元件
棱镜——对不同波长的光折射率不同
分出光波长不等距
色散元件
光栅——衍射和干涉
分出光波长等距
3.样品室
•样品室放置各种类型的吸收池(比色皿)和相应
的池架附件。
•吸收池:
玻璃——能吸收UV光,仅适用于可见光区
石英——不能吸收紫外光,适用于紫外和可
见光区
要求:匹配性(对光的吸收和反射应一
致)
使用时注意保护透光面
4.检测器:
利用光电效应,将光信号转变为电信号的装置
光电池
光电管:紫敏:200~625nm;红敏:
625~1000nm
光电倍增管
光二极管阵列检测器PDA:全波长光
谱测量(非光学扫描)
5.记录装置:
讯号处理和显示系统
二、紫外可见分光光度计
单光束、双光束、双波长和光二极管阵列
1.单光束分光光度计:
特点:
•从光源到检测器只有一个光
束,一束单色光,结构简单
•须将空白、样品池一次推入
光路→移动误差
•一般不宜进行扫描测定光谱
2
.
计度光光分束光双
特点:
•产生两束光,交替通过空白与样品池
•不用拉动吸收池,可以减小移动误差
•可以自动扫描吸收光谱
双光束
3.双波长分光光度计
特点:
•有两个单色器,产生两束不同波长的光,
测出两波长的吸收度
•利用吸光度差值定量
•消除干扰和吸收池不匹配引起的误差
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