2024年度专题2课题1微生物的实验室培养ppt课件.pptx

专题2课题1微生物的实验室培养ppt课件12024/3/23

微生物实验室培养概述细菌实验室培养技术真菌实验室培养技术病毒实验室培养技术微生物实验室培养应用举例实验注意事项及安全规范contents目录22024/3/23

01微生物实验室培养概述32024/3/23

01培养基类型02天然培养基：成分不确定，效果不稳定03合成培养基：成分明确，效果稳定04培养基选择05根据微生物的营养需求选择适当的培养基06考虑培养基的物理化学性质，如pH值、渗透压等培养基类型与选择42024/3/23

无菌操作的意义避免微生物污染，保证实验结果的准确性防止有害微生物的传播和扩散无菌操作技术52024/3/23

无菌操作技术要点实验室环境要清洁，定期进行消毒处理实验器具要无菌，使用前需进行灭菌处理操作人员要注意个人卫生，穿戴无菌工作菌操作技术62024/3/23

迟缓期微生物适应新环境的过程对数期微生物以指数形式快速增长微生物生长曲线及测定方法72024/3/23

稳定期微生物数量达到动态平衡衰亡期微生物数量逐渐减少微生物生长曲线及测定方法82024/3/23

利用显微镜或电子计数器直接计数微生物数量直接计数法比浊法重量法通过测量培养液的浊度来间接反映微生物数量通过测量一定体积培养液的干重或湿重来计算微生物数量030201微生物生长曲线及测定方法92024/3/23

02细菌实验室培养技术102024/3/23

通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。平板划线法将骏业进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。稀释涂布平板法利用细菌在液体培养基中的生长特性，通过选择不同的培养条件，将目的细菌从混合菌液中分离出来。液体培养基分离法细菌分离与纯化112024/3/23

利用显微镜观察并计算一定体积样品中的细菌数量。显微镜直接计数法根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。比浊法通过测量一定体积培养液的干重来计算细菌的数量。测重法细菌计数方法122024/3/23

常规保存法冷冻干燥保存法液氮超低温保存法复苏方法细菌保存与复苏将细菌保存在斜面培养基上，定期转接活化。将细菌悬浮在保护剂中，放入液氮罐中保存，温度可达-196℃，使细菌长期保持活性。将细菌悬浮在保护剂中，冷冻后在真空状态下除去水分，使细菌处于休眠状态。将保存的细菌取出，进行适当的活化处理，如加热、加入营养物质等，使其恢复生长活性。132024/3/23

03真菌实验室培养技术142024/3/23

真菌分离与纯化采样与预处理从自然环境中采集真菌样品，进行预处理以去除杂质和提高分离效率。分离方法采用平板划线法、稀释涂布平板法等方法进行真菌的分离。纯化与筛选通过多次传代培养，获得纯化的真菌菌株，并进行筛选以获取目标菌株。152024/3/23

生理生化特性研究真菌的生理生化特性，如营养类型、温度要求、pH值等。形态观察利用显微镜观察真菌的形态特征，如菌丝、孢子等结构。分子鉴定采用分子生物学方法对真菌进行鉴定，如PCR扩增、DNA测序等。真菌形态观察及鉴定方法162024/3/23

保存方法采用斜面保存法、液体石蜡保存法、冷冻干燥保存法等方法进行真菌的保存。复苏方法将保存的真菌进行复苏培养，恢复其活性并进行后续实验。注意事项在保存和复苏过程中，需要注意防止污染和保持适当的温度和湿度条件。真菌保存与复苏172024/3/23

04病毒实验室培养技术182024/3/23

123利用特定细胞系或原代细胞进行病毒增殖，通过细胞病变效应（CPE）观察病毒增殖情况。细胞培养法将病毒接种于鸡胚尿囊腔或羊膜腔内，利用鸡胚提供的营养和环境条件进行病毒增殖。鸡胚培养法将病毒接种于易感动物体内，通过观察动物的发病情况和病理变化来判断病毒的存在和增殖情况。动物接种法病毒分离与纯化192024/3/23

将病毒与单层细胞共同培养，形成空斑后计数空斑数量，推算病毒滴度。空斑试验通过半数组织培养感染剂量（TCID50）的测定，计算病毒滴度。TCID50法利用噬菌斑形成单位（PFU）的测定，计算病毒滴度。PFU法病毒滴定方法202024/3/23

03干燥保存法将病毒液干燥后保存，可长期保持病毒的活性，但需要特定的干燥和保存条件。01低温保存法将病毒液置于-20℃、-70℃或液氮中保存，可长期保持病毒的感染性。02冻融法将病毒液反复冻融，使病毒从细胞中释放出来，同时保持病毒的活性。病毒保存与复苏212024/3/23

05微生物实验室培养应用举例222024/3/23

通过培养和分析环境中的微生物，可以了解环境污染的程度和类型，如重金属污染、有机污染等。监测环境污染微生物群落结构的变化可以反映环境质量的状况，如水体