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化妆品最低抑菌浓度测定实验
化妆品祛痘功效评价的体外测试:
1、抑菌测试
测试原理:痤疮丙酸杆菌的大量增殖是引起痘痘形成和加重的
重要因素之一,那么测定宣称有祛痘功效的化妆品对痤疮丙酸杆菌
的抑制效果可反映其祛痘功效。
测试方法:用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度,用悬液定量
法测定抑菌率,用抑菌圈法(也称扩散法)检测抑菌效果。
功效评价:将抑菌功效按照形成抑菌圈的大小来分级进行评
估,用游标卡尺测量抑菌环直径,按照《WS/T650—2019》中抑菌环
实验的结果判定标砖,直径大于7mm者,产品有抑菌作用。抑菌环
直径不大于7mm者,产品无抑菌作用。
2、抑制炎症测试
测试原理:巨噬细胞与单核细胞均为吞噬细胞,参与体内免疫
反应;维甲酸为已知的治疗寻常痤疮的药物。在痤疮发生发展中,
痤疮丙酸杆菌是诱发局部炎症的重要因素,可以利用痤疮丙酸杆菌
或LPS刺激,建立特异性痤疮炎症模型,再通过检测细胞活性、细
胞形态和细胞分泌炎症因子的情况,来评价护肤品的祛痘功效。
测试方法:以痤疮丙酸杆菌刺激后的单核细胞(THP-1)为模
型,以维甲酸为阳性对照,通过检测最直观的指标炎症因子——IL-
1β的分泌情况,评价化妆品的祛痘功效;
功效评价:两种浓度的化妆品与阴性对照组对比,均有显著差
异,说明该化妆品具有良好的祛痘功效。
不过,最新的《化妆品功效宣称评价规范》中规定了,祛痘类
护肤品必须要进行人体实验。因此,上述两种方法只适用于前期的
原料筛选和化妆品配方开发及改良。
目前对于化妆品祛痘功效评价,主要通过受试者自我评估和仪
器检测两种方法。
化妆品祛痘功效评价的受试者自我评估法:
受试者自我评估是一种主观程度较高的评价方法。
受试者根据样品的使用情况,通过受试者自我评估,反映自我
感知的祛痘效果。此外,还可设置相应问题,考察受试者对产品的
肤感、状态等的喜爱程度,整体评价主观程度高。
化妆品祛痘功效评价的仪器测试法:
1、皮肤油脂测试仪:
皮肤油脂测试仪基于光度计原理设计,利用一种0.1mm厚的消
光胶带,吸收人体皮肤上的油脂后,胶带变成半透明,导致透光量
发生变化,间接反映皮肤油脂含量。
2、经皮水分散失测试:
痤疮患者的皮肤屏障功能会受到一定损伤,较正常人皮肤经表
皮失水率增高。测定皮肤水分的散失情况,可间接反映受试物对痤
疮患者皮肤的改善作用。
3、皮肤水分含量测试
正常皮肤含水量为20%~35%,痤疮患者一般皮肤屏障功能受
损,影响皮肤表层的水分保持能力,皮肤水分含量降低。同时,痤
疮患者皮肤常发生炎症反应,致使皮肤表面温度升高,加速新陈代
谢,导致水分含量降低。因此,在进行祛痘功效评价时,水分含量
的改善是一个可观测的评价指标。
4、图像分析测试
卟啉是痤疮丙酸杆菌利用油脂代谢产生的一种分泌物,常常堵
塞毛孔,导致痤疮。利用VISIA或VISIA-CR拍照,在橙光条件下,
卟啉可发出荧光,呈现出圆形白色斑点,间接反映皮肤中痤疮丙酸
杆菌的数量。荧光点计数值即卟啉值,卟啉值越高表示痤疮丙酸杆
菌越多。
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