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离子对色谱
离子交换色谱
离子对色谱法
对强极性的有机酸和有机碱的分离？
将一种或多种与溶质离子电荷相反的离子加入到
流动相或固定相中，使其与溶质离子结合形成疏
水性的离子对化合物，从而控制溶质的保留行为
的一种色谱分离方法。
离子对色谱法
1.固定相和流动相
固定相：正相键合固定相；反相键合固定相。
流动相：一般含有适当有机反离子的溶剂。
烷基铵盐离子对试剂，用于阴离子的分离；
烷基磺酸盐离子对试剂，用于阳离子的分离。
离子对色谱法
2.分离原理
固定相为非极性键合相，流动相为水溶液，于流动相中加入与待测离子A+
-+−
电荷相反的离子B，形成疏水性离子对AB：
+−K+−
A+B疏水性
平衡常数：分配系数：
−
+−+−=K⋅[]
[][A]AB
K=+−=+
[][][]
核酸、核苷、儿茶酚胺类物质的分离
离子交换色谱
1.固定相和流动相
固定相：阴离子交换树脂或阳离子交换树脂；
流动相：盐类缓冲溶液（一定pH和离子强度）。
离子交换色谱
2.分离原理
基本原理：
组分在固定相上发生离子交换反应；组分
与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、
电荷多少等有关。亲和力大，保留时间长。
-++-++
阳离子交换反应：R-SONa+M＝R-SOM+Na
33
阴离子交换反应：R-NR3+Cl-＋X-＝R-NR3+X-＋Cl-
离子交换色谱
在离子交换色谱中，常通过改变流动相的pH、离子
强度等条件来控制分配比k，改变离子交换剂的选
择性，进而影响待测物的分离。
既适于无机离子，也适于有机物分离，如蛋白质、
氨基酸、核酸等。
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