中药制剂的含量测定技术—紫外可见分光光度法测定含量.pptx

中药制剂的含量测定技术;2;3;配制一系列不同浓度的对照品溶液，选择合适的参比溶液，在相同条件下分别测定各对照品溶液的吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制A-C曲线，称为标准曲线或工作曲线。然后在完全相同的条件下测定样品溶液的吸光度，从标准曲线(或回归直线)上查出样品溶液的对应浓度，或代入回归方程，求出样品溶液的浓度。;在做精密测量时，用对照品溶液的浓度进行线性回归，求出回归直线方程（相关系数r≥0.999），绘出回归直线代替标准曲线，以尽量消除偶然误差。

亦可利用计算器将一系列对照品溶液的浓度与相应的吸光度进行一元线性回归，求出回归方程（相关系数≥0.9990），将供试品溶液的吸光度代入回归方程，算出供试品溶液的浓度。;回归方程：A=a+bC

式中，A为被测溶液吸光度；C为被测溶液浓（g/ml）；a为截距；b为斜率。;

标准曲线法多用于可见分光光度法，由于显色时影响颜色深浅的因素较多，有的仪器单色光纯度较差，故测定时应用对照品同时操作。

本法适用于批量供试品的分析，当仪器和测定条件固定时，标准曲线可多次使用。;中药制剂的含量测定技术;9;10;按药品标准的规定，在相同条件下，在规定波长处分别测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度，按下式计算供试品溶液中待测组分的浓度。

CX＝×CR

式中：AR为对照品溶液的吸光度；AX为供试品溶液的吸光度；CR为对照品溶液的浓度；CX为供试品溶液的浓度。

;

试验中所用的量瓶和移液管均应经检定、校正、洗净后使用

使用的吸收池必须洁净

取吸收池时，手指只能拿毛玻璃面的两侧

称量应按《中国药典》的规定进行

除各药品标准已有注明者外，供试品溶液及对照品溶液的浓度的吸光度应在0.3～0.7之间及所用仪器吸光度的线性范围内。;中药制剂的含量测定技术;14;15;按药品标准规定的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度（A），根据A=KCL与药品标准规定的被测物质的吸收系数E，计算供试品溶液的浓度C供（g/100ml）。

当L=1cm时，C供=A供E，再根据供试品溶液的稀释倍数（D供）、供试品溶液容积（V样）和供试品取样量（W供）??计算出被测物质的含量。

含量（W/W%）=(C供×D供×V样)/(100×W供)

本法测定时无需对照品，方法简便。

;含量计算公式有两种：

1)含量（mg/丸）=

[C供（mg/ml)×D供×V样(ml)×平均丸重（g/丸））]/W样（g）

2)含量（标示量%）=

[C供（mg/ml)×D供×V样(ml)×平均丸重（g/丸）]/[W样（g)×标示含量（mg/丸）]×100%

计算过程中应先将相关数据的单位写出，计算时再将相同单位约去，若等号两侧单位相同，则说明公式建立正确。;

波长准确度的校正;

吸光度的校正;

杂散光的检查;

吸收池的校正分别在两个洁净的统一规格、同一材料的吸收池中装入同一溶剂（一般可用水），将比色皿按相同方向放入吸收池架上，用同一波长的光（电磁辐）测定透光率，如透光率之差在0.3%以下者可配对使用

狭缝宽度的选择狭缝宽度应小于供试品吸收峰半高宽的十分之一，否则测得的吸光度值会偏低，狭缝宽度的选择，应以减小狭缝宽度时供试品的吸光度不再增大为准;

最大吸收波长的选择除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长士2nm以内，并以吸光度最大的波长作为测定波长

溶剂的要求含有杂原子的有机溶剂，通常均具有很强的末端吸收。因此，当作溶剂使用时，它们的使用范围均不能小于截止使用波长;作者：八音魔琴;贰;基础知识;必备知识;必备知识;必备知识;必备知识;必备知识;必备知识;必备知识;必备知识;必备知识;紫外-可见分光光度计工作原理

根据光路数目和波长种类的不同，分为单光束分光亮度计和双光束分光光度计及单波长分光光度计和双波长分光光度计。

单光束分光光度计的工作原理

由光源发出的光，经单色器获得一定波长的单色光（平行光），单色光作为入射光轮流照射参比溶液和供试品溶液，分别测得参比溶液和供试品溶液的吸亮度并计算含量的方法;紫外-可见分光光度计工作原理

单波长双光束分光亮度计的工作原理

从光源中发出的光经单色器分光后经反射镜（M1）（或切光器）分解为强度相等的两束光，一束通过参比溶液，另一束通过供试品溶液，检测器在不同的瞬间接受和处理参比信号和供试品信号，并自动比较两束光的强度，其信号差经对数转换系统处理后由显示器显示出透光率、吸亮度、浓度。也可对不同波长的入射光的测定结果进行扫描，绘制吸收光谱，进行定性、定量分析。;紫外-可见分光光度计工作原理