高级神生物学脑缺血缺氧.pptx

脑缺血缺氧Cerebralischemiaandhypoxia（一）操作方法神经生物学系

赵丽

阶平楼105

脑的供血系统腹侧面椎动脉颈内动脉

椎动脉—基底动脉小脑上动脉大脑后动脉后交通动脉后交通动脉

颈内动脉大脑中动脉大脑前动脉前交通动脉大脑后动脉

脑组织耗氧量占全身耗氧量的20%-30%，主要依赖于糖的有氧代谢，几乎无能量储备。若阻断脑血流6秒钟神经元代谢受影响，2分钟脑电活动停止，动物实验发现，缺血4-5分钟可产生不可逆脑损害。脑血流量减少引起的脑功能障碍-------脑血管疾病。根据起病急缓分为：急性脑血管病，又称脑卒中。包括缺血性（血栓或栓塞）和出血性（脑血管破裂），均有神经功能缺失。慢性脑血管病是慢性脑供血不足引起脑代谢和功能障碍，如血管性痴呆。根据疾病状态和神经功能缺失持续时间分为：短暂性脑缺血发作；脑卒中；可逆性缺血性神经功能缺失；进展性卒中；完全性卒中。根据病情严重程度分为：小卒中；大卒中；静息性卒中。根据病理性质分为：缺血性卒中和出血性卒中。

（一）改善脑血循环1．溶栓：溶栓治疗足目前最重要的恢复血流措施，重组组织型纤溶酶原激活剂（rtPA）和尿激酶（UK）是我国目前使用的主要溶栓药，目前认为有效抢救半暗带组织的时间窗为4.5h内或6h内。2．抗血小板：阿司匹林能显著降低随访期末的病死或残疾率，减少复发，仅轻度增加症状性颅内出血的风险。3．抗凝4．降纤5．扩容6．扩张血管（二）神经保护理论上，针对急性缺血或再灌注后细胞损伤的药物（神经保护剂）可保护脑细胞，提高对缺血缺氧的耐受性。钙拮抗剂、兴奋性氨基酸拮抗剂、神经节苷脂、镁剂和NXY～059等在动物实验中的疗效都未得到临床试验证实。

脑缺血研究的常用动物模型全脑缺血模型局部缺血模型离体缺血模型

全脑缺血模型四血管结扎法两血管结扎法心搏骤停法颅内加压颈部加压法断头法低氧法胸内血管夹闭法

四血管阻断法永久性封闭两条椎动脉和暂时结扎两条颈总动脉。利用四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型的解剖学基础在于:大鼠腹侧的脊髓动脉具有一走向脑干的返支,4血管闭塞期间可维持脑干的血液供应,使动物得以存活。

四血管阻断法俯卧位固定,显露第一颈椎双侧的翼孔,插入微型双极电凝镊,烧灼翼孔,缝合伤口。将鼠仰卧位固定,暴露双侧颈总动脉,游离后置线,系活结,缝合伤口,置笼喂养,自由饮食,24h后于清醒状态下抽紧丝线,结扎双侧颈总动脉,以大鼠翻正反射消失,眼球变白为判定大鼠全脑缺血的标准。缺血15min后剪断丝线,使血液再灌注。

四血管阻断法优点：有操作相对简便,可较好地模拟临床上因低血压休克、心肺脑复苏等造成全脑缺血性损伤过程,易于做大宗实验等优点,至今仍广泛应用于缺血性脑损伤的研究中缺点：个体差异较大，建模成功率和可靠性较低。

二血管阻断法阻断双侧颈总动脉（commoncarotidartery，CCA）加动脉放血造成低血压而形成前脑缺血。若单纯结扎双侧CCA而不降低血压，则难以使脑血流量（cerebralbloodflow，CBF）降低至缺血和能量代谢紊乱的程度。方法评价优点：该法手术简便易于操作，成功率高。缺点：仅形成不完全脑缺血，造成的低血压严重干扰其他器官的血供及实验结果；不能在动物清醒状态下进行，无法进行神经行为学的观察。

局部缺血模型大脑中动脉结扎法单侧颈总动脉结扎法光化学诱导局部血栓形成

单侧颈总动脉结扎法沙鼠的willis环没有后交通动脉，所以单侧颈总动脉结扎主要应用于沙鼠。由于手术过程简单，该模型常用于大规模的药物筛选。

光化学诱导局部血栓形成RoseBengal与光之间的光化学反应导致微血管内血小板聚集。静脉内注射该试剂后，用560nm波长的光照射颅部就可以诱导形成局部血栓。优点：可以控制脑梗死在任何皮质区。脑损伤大小易控制。缺点：永久性动脉末端阻闭不能代表人类卒中，且损伤难以治疗。

大脑中动脉结扎法大脑中动脉（middlecerebralartery，MCA）闭塞模型被普遍认为是局灶性脑缺血的标准动物模型，因为MCA是人群脑卒中的多发部位。所以大多数局灶性脑缺血模型可通过栓塞、结扎、夹闭或电凝MCA制作。

梗死区和半影区梗死区：缺血中心部位脑梗死。梗死区细胞表现为水肿和坏死。半影区：梗死边缘区。随着缺血程度加重或时间延长，半影区的神经元损伤加重，导致继发性细胞死亡，梗死区扩大。在脑卒中治疗中，通常讲的脑保护主要是指对半影区神经元的保护。

TTC染色1原理：TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物，1894年首次合成用来检测种子的生存能力，1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质