腺病毒中文操作手册.pdfVIP

腺病毒重组系统

AdEasyTM操作手册目录

第一章简介1系统中产生重组腺病毒的时程3

第二章应用重组腺病毒的优点2第四章主要流程4

第三章AdEasyTM技术3将基因克隆入AdEasyTM转移载体4

技术概况34.1.1

缩写英文全称中文全称

AdAdenovirus腺病毒Ad5Adenovirusserotype5血清5型腺MOIMultiplicityofInfectionVirus/Cell感染复数

病毒AdVAdenoviralVector腺病毒载体AmpAmpicillin氨苄mRNAMessengerRNA信使

青霉素-Galβ-Galactosidaseβ-半乳糖苷酶bpBasePair碱基RNAMWCOMOIecularWeightCut-offPAGEPolyAcrylamide

对BSABovineSerumAlbumin小牛血清白蛋白GelElectrophoresis聚丙烯凝胶电泳

cDNAComplementaryDNA互补PBSPhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲液

DNAcccDNAClosedCircularCoiledDNA闭环螺旋PFUPlaqueFormingUnit空斑形成单位piPostInfection感染后

DNACPECytopathicEffect细胞病理效应RCAReplicationCompetentAdenovirus增殖性腺病毒

CsClCesiumChloride氯化铯RITRRightInvertedTerminalRepeat右侧反向末端重复

DMEMDulbecco’sModifiedEagleMediumDMEM培养基SDSSodiumDodecylSulfate十二烷基硫酸钠

DMSODimethylSulfoxide二甲基亚砜DTTDithiothreitol二TBETrisBorate/EDTA三羟甲基氨基甲烷硼酸盐/乙二胺四

硫苏糖醇EDTAEthyleneDiamineTetraaceticAcid乙二胺四乙乙酸TCID50TissueCultureInfectiousDose5050%组织培养感

酸EtBrEthidiumBromide溴化乙锭FBSFetalBovineSerum胎染剂量TCPTotalCellularProtein细胞总蛋白

牛血清HrHour小时ITRInvertedTerminalRepeat反向末端重TETris/EDTATE溶液wtWildType野生型

复KanKanamycin卡那霉素kbKilobases千碱基对X-Gal5-bromo-4-chloro-3-indolyl-D-Galactopyranoside5-溴

KDaKiloDaltons千道尔顿LBLuria-BertanibrothLB培养基-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷

MCSMultipleCloningSite多克隆位点MinMinute分钟

第一章简介

当今基因输送技术的发展日趋复杂,一些治疗药物生长激素、干扰素、抗病毒和抗癌复合物和诊断性蛋白单克隆抗体的设

计、发展与合成需要更高效的基因输送工具;人类基因组计划和正不断发展的基因治疗同样急需发展快速有效和治疗性的

分析工具;为解决这一问题,基因输送技术通常使用病毒载体如增殖缺陷的腺病毒通过基因工程不断发展,致力于生产基因表

型药物;重组腺病毒提供了一类在基因转移系统发展中有极大潜力的新的生物治疗剂;

1953年对普通感冒病因的探索和研究导致了腺病毒的发现;迄今为止已发现了40多种不同血清型和93种不同种类的腺病

毒,它们通常感染眼、呼吸道或胃肠上皮Fields等,1996;1977年,FrankGraham博士建立了一种细胞株,