（正式版）-B-T 42821-2023 贝类包纳米虫病诊断方法.docxVIP

ICS65.020.30

CCSB41

中华人民共和国国家标准

GB/T42821—2023

贝类包纳米虫病诊断方法

Diagnosticmethodsforbonamiosisofmolluscs

2023-08-06发布

2024-03-01实施

国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

发布

I

GB/T42821—2023

目次

前言 Ⅲ

1范围 1

2规范性引用文件 l

3术语与定义 1

4缩略语 1

5试剂和材料 1

6器材和设备 2

7临床症状 3

8采样 3

9组织印片检查 3

10组织病理检查 3

11PCR检测 4

12荧光PCR检测 5

13综合判定 6

附录A(规范性)组织印片、组织病理检查及DNA提取相关溶液配制 7

附录B(资料性)贝类包纳米虫病 10

附录C(资料性)目标扩增序列及引物、探针的位置 13

Ⅲ

GB/T42821—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中华人民共和国农业农村部提出。

本文件由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口。

本文件起草单位：中国检验检疫科学研究院、中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术

推广总站、广州海关。

本文件主要起草人：吴绍强、王彩霞、白昌明、李清、邓艳、冯春燕、王崇明、阴鸿达、袁向芬、许晓琳、

柏建山。

1

GB/T42821—2023

贝类包纳米虫病诊断方法

1范围

本文件给出了贝类包纳米虫病(bonamiosis)诊断的缩略语、试剂和材料、器材和设备，描述了临床

症状、采样、组织印片检查、组织病理检查、PCR检测、荧光PCR检测和综合判定的方法。

本文件适用于牡蛎包纳米虫(Bonamiaostreae)和杀蛎包纳米虫(Bonamiaexitiosa)引起的贝类包

纳米虫病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于

本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T18088出入境动物检疫采样

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

3术语与定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

bp:碱基对(basepair)

Ct:扩增循环数(cyclethreshold)

DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)

dNTPs:脱氧核糖核苷三磷酸混合物(deoxy-ribonucleosidetriphosphatemixture)

EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid)

FAM:羧基荧光素(carboxyfluorescein)

PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)

SDS:十二烷基硫酸钠(Sodiumdodecylsulfate)

Taq:水生栖热菌(Thermusaquaticus)

TE:Tris盐酸和EDTA缓冲溶液(EDTATris·HCl)

Tris:三羟甲基氨基甲烷(trishydroxymethylaminomethane)

5试剂和材料

本文件中所有化学试剂，除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

2

GB/T42821—2023

5.1水：符合GB/T6682中规定的一级水。

5.2丙酮：常温保存。

5.3甲醇：常温保存。

5.4无水乙醇：常温保存。

5.5生理盐水(0.9%):常温保存。

5.610×PCR缓冲液(无Mg2+):-20℃保存。

5.7MgCl?溶液(25mmol/L):-20℃保存。

5.8dNTPs(A、T、G、C四种碱基各2.5