绿色植物色素的提取实验报告.pdfVIP

竭诚为您提供优质文档/双击可除

绿色植物色素的提取实验报告

篇一：绿色植物中色素的提取和分离

绿色植物中色素的提取和分离

[实验名称]绿色植物色素的提取及色谱分离

[教学目标]知识与技能:通过对绿色植物色素的提取与

分离，了解天然产物分离提纯的方法

[教学重点]学习柱色谱和薄层色谱分离的基本原理及

操作方法

[教学难点]薄层色谱、柱层析实验操作要点的掌握和应

用

[教学方法]陈述法，讲演法

[教学过程]

[讲述]【实验目的】

1.通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质分离

提纯方法；

118

2.通过对柱色谱和薄层色谱操作方法的掌握，加深了解

微量有机物色谱分离、鉴定的原理。

[讲述]【背景知识】

绿色植物的叶、茎中，如菠菜叶，含有叶绿素（绿）、

胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。叶绿素存

在两种结构相似的形式即叶绿素a(c55h72o5n4mg)和叶绿素

b(c55h70o6n4mg)，其差别仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰

基所取代从而形成了叶绿素b。它们都是吡咯衍生物与金属

镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。植物中

叶绿素a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一

些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些

非极性的溶剂。胡萝卜素（c40h56）是具有长链结构的共轭

多烯。它有三种异构体，即a-胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-

胡萝卜素，其中β-胡萝卜素含量最多，也最重要。叶黄素

（c40h56o2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量

通常是胡萝卜素的两倍。与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于

醇而在石油醚中溶解度较小。

本实验先根据各种植物色素的溶解度情况将胡萝卜素

（橙）、叶黄素（黄）、叶绿素a和叶绿素b从菠菜叶中提取

出来，然后根据各化合物物理性质的不同用色谱法进行分离

和鉴定。

[图示]【分离产物结构式】

218

叶绿素a、叶绿素b、叶黄素（黄）和β-胡萝卜素的结

构式如下图所示：

[讲述]【色谱法原理】

色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法。其

分离原理是利用混合物中各个成分的物理化学性质的差别，

当选择某一个条件使各个成分流过支持剂或吸附剂时，各成

分可由于其物理性质的不同而得到分

离。与经典的分离提纯手段（重结晶，升华，萃取和蒸

馏等）相比，色谱法具有微量、快速、简便和高效等优点。

按其操作不同，色谱可分为薄层色谱、柱色谱、纸色谱、气

相色谱和高压液相色谱等。在此，我们学习柱色谱和薄层色

谱（TLc）。

1.柱色谱原理

液体样品从柱顶加入，流经吸附柱时，即被吸附在柱中

固定相（吸附剂）的上端，然后从柱顶加入流动相（洗脱剂）

淋洗，由于固定相对各组分吸附能力不同，以不同速度沿柱

下移，吸附能力弱的组分随洗脱剂首先流出，吸附能力强的

组分后流出，分段接收，以此达到分离、提纯的目的。

2.薄层色谱原理

由于混合物中的各个组分对吸附剂（固定相）的吸附能

力不同，当展开剂（流动相）流经吸附剂时，发生无数次吸

附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前移动，吸

318

附力强的组分滞留在后，由于各组分具有不同的移动速率，

最终得以在固定相薄层上分离。其应用主要有：跟踪反应进

程；鉴定少量有机混合物的组成；分离；寻找柱色谱的最佳

分离条件等。

[提问]试比较叶绿素、叶黄素和胡萝卜素三种色素的极

性，为什么胡萝卜素在层析柱中移动最快？

[讲述]【实验试剂】

新鲜菠菜3g、石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、硅胶g、

中性氧化铝

[讲