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水质环境监测微生物的质控方法

摘要：水质监测质量保证是一种保证监测数据准确可靠的方法，是整个监测

过程的全面质量管理。为保证实验室内分析质量所采取的一系列控制措施，文章

针对水质监测微生物实验室的质量控制进行探讨。

关键词：水质环境监测；实验室；质量控制

水质环境监测质量控制是环境监测质量保证的一个部分，它包括实验室内部

质量控制和实验室外部质量控制。实验室内部质量控制，是实验室自我控制的常

规程序，它反映分析质量稳定性状况，发现分析中的异常情况，随时采取相应的

校正措施，也就是避免和减少在任何一个实验操作过程中，由于人为的、设备上、

材料供应上、采样步骤和分析方法上所产生的错误，实行有次序的实际工作。

1水质监测微生物样品的采集

1.1水质监测微生物实验室先备齐采集微生物样品的无菌采样玻璃瓶

许多水体随时间和空间会发生很大变化，必须制定出合理的采样规划。为保

证采集的水样必须有代表性，采样时固定取水点，统一时间；采水量应为瓶容量

的80%，以便在检验时充分混匀；采样时应直接采集，不得用水样刷洗已灭菌的

采样瓶，并避免手指和其他物品对瓶口的玷污；采样时不可搅动水底的沉积物；

采集管网水的样品前应对水龙头进行消毒，方法为用火焰在龙头表面烧灼片刻

（3～5s），而后放水5～10min；我区农村生活饮用水部分水样为蓄水池，需要

备一干净的水桶，放入水池中数分钟，尽量不取表面水，提水后将水灌入无菌瓶

中，手注意不要接触到无菌瓶口和瓶塞。

1.2水样的保存达到减缓微生物繁殖的作用

本实验室采用低温冷藏箱来保存水样，水样全部采集后立即送回实验室；在

运输中，玻璃容器要防止破裂，须有固定措施，防止样品容器倾倒和样品溢出。

2室内质量控制

2.1运行全面的质量管理

本中心2004年通过计量认证，2008年计量认证通过复审。在微生物学检验

工作中，影响检测工作质量的设施环境包括无菌间（洁净室）、生物安全柜、培

养箱、冰箱、压力蒸汽灭菌装置等。在日常工作中，必须保证这些设施、设备始

终处于良好状态，定期对仪器进行正确维护、校准质控。本实验室有一台老式恒

温培养箱，由于胶条老化，每次需细致检查所显示温度以及可否关闭严密，以免

影响检测工作质量。灭菌室要保持清洁，需要带入无菌室使用的仪器、器械、平

皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过高温灭菌。使用的刻度吸管一定要在管

口塞好棉塞，避免洗耳球不洁对实验结果产生影响。加强无菌观念，操作要严格。

2.2每批培养基在使用前，须经无菌检验

配置每批培养基均要做好记录，登记培养基的名称、批次、成分和含量、配

制日期、灭菌条件、pH值、有效期、无菌检验以及配置人。培养基应该以少量

勤配为宜。

2.3量值溯源的质量控制

一般情况下，微生物检验结果不作复检，故异常或超标结果调查时，需检查

所用的实验器具、材料、溶液、样品是否正确和符合要求；与检验人员讨论检验

方法，确认无操作和理解方面问题；确认检验仪器设备运行正常；确认检验操作

有无差错；检验同一时段其他样品的检验结果和微生物鉴定结果；阴性和阳性对

照是否得当；检验时环境质量状况及其污染菌鉴别资料。

3水质微生物样品检测中的质量控制

微生物水样采集后送至水质检测室，同时将样品的相关信息及记录移交给接

样员，接样员给予水样惟一的样品编号。样品进入到生物检测室后，检测人员应

严格参照水质标准GB/T5750.12－2006所规定的方法对微生物样品无菌操作进

行检测，同时进行培养基空白对照。检验中所用的一切用品必须是完全灭菌的，

在灭菌前应彻底洗涤干净，121e高压蒸汽灭菌20min，或160e干烤2h。培养

基和稀释液按规定要求进行高压蒸汽灭菌。

3.1检测菌落总数的质量控制

在接种前应将水样充分摇匀，使水中的细菌均匀分布于水中；水样稀释时应

小心沿管壁加入，不要触及管内稀释液，以防吸管尖外侧部分粘附的检液混入其

中。将水样注入皿内时，从皿侧加入，不要揭去皿盖，最后将吸管直立使水流空，

并在皿底干燥处再擦一下吸管尖将余液排出，而不要吹出。为防止产生片状菌落，

水样加入平皿后，在20min内向皿内倾入营养琼脂培养基，并立即混合均匀。

皿内琼脂凝固后，不要放置长久后才翻转培养，而应于琼脂凝固后，在数分钟内

将平皿翻转进行培养，这样可避免菌落蔓延生长。

3.2检测大肠菌群的质量控制

接