包含体纯化步骤.docx

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包含体纯化步骤(精)

同样承受Ni-NTAHis结合树脂亲和纯化重组目的蛋白,

1、200mL菌液离心收集大量诱导的菌体,并用1×PBS缓冲液洗涤两次。

2、将保存的菌体沉淀用总体积为20mL的1×BindBuffer(300mMNaCl,50MmNaHPO4;10mMimidazote,pH8.0)重悬,在冰浴中超声波破菌至溶液呈白色澄清。

2

3、4℃12,000rpm离心30分钟,然后用20mL的包涵体洗涤Buffer(50mmol/L

Tris-HCl,100mmol/LNaCl,1mmol/LEDTA,0.5%Triton

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