多糖提取——精选推荐.pdfVIP

传统的海带多糖的提取方法包括:热水提取法、酶提取法、碱

提取法，度是而这些提取方法都存在一定的缺陷。热水提取

的方法采用的温70^-80}C耗能多，提取时间长.工业生产需

要使用的酶量大，不经济。酶提取的方法提取的时间长，碱

提取法是现在工业提取海带多糖的主要方法，但是碱提取方

法会造成多糖生物活性的降低。因此寻找合适的提取方法来

降低能耗，提高海带多糖的提取率以及活性变得越来越重

要。为达到这一目的，我们现采用超声波方法来提取海带多

糖，随后对其理化性质和生物学活性进行检侧，并与传统方

法进行比较，以期得到海带多糖提取的最佳方法。

配制1%的碳酸钠溶液:称取15g无水碳酸钠加入1500mL水

称取制备好的200g海带粉，置于不锈钢桶中，加入配好的

碳酸钠溶液2.8L,在50℃水浴5h，趁热用棉纶网进行吊滤，

并不断用热冲洗保持温度，获得的吊滤液于5000r/min离心

15min，保留上清液。按体积比平均分成两份，一份上清液

经减压浓缩(40℃)后，加入三倍体积95%乙醇，沉淀过夜。

离心后获得海带粗多糖E.另一份上清液中加入氛化钙

(2g/1OOmL)，静置，5000r/min离心去除揭藻酸钙。上清液

经减压浓缩(40℃)后，加入三倍体积95%乙醉，沉淀过夜.

离心后获得海带硫酸多糖F.

将以上所得沉淀E,F各重新溶于水，离心除去不溶物。

上清液再加三倍体积95%乙醇，静置沉淀.生成沉淀经无水乙

醇、乙醚洗涤，重新溶于蒸馏水，置于一20℃冰箱冷冻过夜，

冷冻干燥得到海带杂多糖E,以及海带硫酸多糖粗品F1

可溶性大豆多糖是一种从大豆中提取的多糖类

化合物，主要由膳食纤维组成，而膳食纤维对治疗高血

压、高血脂、心血管疾病和肥胖病等具有积极作用[1-3]。

可溶性大豆多糖还具有分散稳定性、乳化性，所以常用

于酸性饮料中[4-5]。其属于酸性多糖，结构类似于果胶，

多数类型由半乳糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸，也包括鼠

李糖、海藻糖、木糖、葡萄糖等。组成最主要的化学结构

是半乳糖醛酸组成的酸性主链和阿拉伯糖基组成的中

性糖侧链，其分子量在5000~1000000之间[6-7]。

用水作溶剂，在碱性条件下从豆渣中提取可溶性

大豆多糖，研究料液比、pH、提取温度、反应时间等因

素对多糖得率的影响，且进行正交试验，获得了较好的

结果。

1.2材料与试剂

大豆豆渣：实验室制备豆乳的残渣；石油醚、氢

氧化钠、盐酸、浓硫酸、苯酚、葡萄糖及乙醇：均为国产

分析纯。

1.3工艺流程

湿豆渣→烘干→磨细→脱脂→碱处理→风干→

浸提→调pH至4.5→抽滤→脱色→离心→上清液→

浓缩→醇沉→过滤→干燥→产品

1.4方法

称取10.0g干燥的细豆渣粉，采用石油醚在索氏

抽提器中脱脂处理3h，风干以后置于3倍pH9.0碱性

水中，于60℃浸泡0.5h，调pH至4.5，然后抽滤，对滤

液进行活性炭脱色，条件是活性炭含量为提取液的2％

（质量分数），60℃反应20min，4000r/min离心30min

上清液用旋转蒸发器进行浓缩，加入95%的乙醇，置

于冰箱中沉淀数小时，过滤，并烘干沉淀物，得到大豆

多糖产品。

1.4.1制作标准曲线

采用苯酚-硫酸法，以葡萄糖为标准物[8]。

80%苯酚：80g苯酚加20g水使之溶解，可置冰箱

中避光长期储存；6%苯酚：临用前以80%苯酚配制。

准确称葡萄糖25mg，于250mL容量瓶中，加蒸

馏水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、

1.8mL，各加蒸馏水至2.0mL；然后加入6％苯酚1.0mL

及98%浓硫酸5.0mL，静置10min，摇匀；室温放置

20min后，于490nm测吸光度，以2.0mL蒸馏水按同

样显色操作作为空白，横坐标为多糖含量，纵坐标为

吸光值，得标准曲线

1.4.2可溶性大豆多糖含量的测定

取一定量脱色离心后的上清液（约含40μg多糖）

于干燥试管中，并以水补至2.0mL，同1.4.1中的操作，

测得吸光度，根据标准曲线，计算多糖含量。

2.1单因素试验

2.1.1料液比对得率的影响

称取干豆渣粉9份各10.0g，脱脂处理、碱处理以

后，放入编好号的三角瓶中，将其pH调节到8.0，料液

比分别为1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶2