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热带生物资源中毒素提取的研究进展
摘要:生物毒素是一类具有重要的生物源化学物质,具有广泛的民用价值和军事意义。
因为热带的特殊气候特征,热带地区的生物资源也是非常丰富,其中生物毒素资源也很丰
富。本文简要综述了各类生物毒素的结构性质以及提取、及其最新研究进展。
关键字:热带生物,毒素,提取技术
1.引言
生物毒素(biologicaltoxins)是生物机体分泌代谢或半生物合成产生的、不可自复制的
有毒化学物质,包括动物、植物、海洋生物和微生物等产生的对其它生物物种有毒害作用
的各种化学物质。生物毒素的研究具有广泛的民用价值和军事意义。由于生物毒素毒性较
高,可发展成为一种潜在的生物武器,对人类健康和国家安全构成了潜在的巨大威胁;作
为治疗药物、抗癌导向药物和预防疫苗,生物毒素及其作用机理、效力等的研究尚在积极
的探索中[1]。生物毒素以其毒性强,结构新颖,药理作用特殊,易合成等特点成为药理
学和神经科学的有力工具和新药开发的新来源。
目前,生物毒素已成为国内外研究药物的热点,但国际上开展生物技术研究的历史并
不长。随着社会的发展和人类对生物资源的影响不断增加以及陆生资源的日益匮乏等原因,
各国都将目光投向了尚远未获得有效开发的热带生物资源。
我国在这一新兴领域的研究起步虽较晚,但相对来说,差距并不很大。因此,应当抓
住当前大好的发展机遇,采取切实有效的具体措施,大规模、有组织、有计划地开发利用
我国的热带生物资源,以使我国在热带生物高技术领域的激烈竞争中能够占有一席地。
多数热带生物毒素均有较强的神经毒性,且可作用于各种离子通道,对神经系统起着
重要作用,因而可成为药理学和神经科学研究的有力工具和新药开发的新来源。同时,由
于人类的很多神经性疾病均与离子通道有关,因此生物毒素还将有可能广泛适用于镇痛、
抗癫痫及其他神经性疾病的治疗,因而它有望成为新型的药物。本文简单介绍几种热带生
物毒素的结构性质以及提取方法。
2.热带生物毒素的提取方法
2.1蓖麻毒素的提取
蓖麻毒素(Ricin)系指蓖麻毒蛋白、蓖麻碱、蓖麻变应原和血球凝集素四种毒性物质,
其中蓖麻毒蛋白的毒性最大。在药物研究中,蓖麻毒蛋白又称蓖麻毒素。在英语中蓖麻毒
素和蓖麻毒蛋白是同一词—“Ricin”。蓖麻毒素对人和哺乳动物有剧毒,几乎对所有真核
细胞都有毒性。一个毒素分子进入细胞内,就足以使整个细胞的蛋白质合成完全停止而死
[2]
亡。
2.1.1脱毒
脱毒是指将蓖麻饼中有毒物质分离去除,使能作为蛋白质饲料应用,从而提高其利
用价值。蓖麻饼中毒素的含量因榨油方法不同而异,同时与各种毒素的分子结构、物理化
学性质有关。就这四种毒素而论,毒蛋白虽组成复杂,但受热易分解而被破坏。蓖麻碱在
碱性条件下易水解,生成无毒的羧酸盐,在高温条件下,如100℃持续20min左右也能被
破坏。变应原在碱性条件下蒸煮15min水解被破坏。血球凝集素在蓖麻饼中含量很低,在
[3]
100℃条件下持续30min即可破坏。所以,蓖麻籽采用热榨法所形成的蓖麻饼中,毒蛋白
和血球凝集素具备被破坏的充分条件,因而,这两种毒素几乎已不存在。而蓖麻碱和变应
原被破坏的条件尚不充分,因此,剩下的主要是蓖麻碱和变应原,特别是变应原,因此热
榨饼粕脱毒主要指脱除蓖麻碱和变应原。
2.1.2提毒
称适量脱脂蓖麻粉于PH为3.8的醋酸水溶液中浸取12h,上清液用蒸馏水透析24h,再用
PH为6.5磷酸缓冲液透析24h,透析液经超速离心30min,上清液为蓖麻毒蛋白粗提液。用
50ml酸式滴定管,内装Sepharose4B,用10mmol/L,PH为6.5的磷酸缓冲液平衡,然后
将蓖麻毒蛋白粗提液从酸式滴定管顶端注入,以0.25ml/min的流速通过层析柱,再用
10mmol/L,PH为5.0HAC-NaAC缓冲液洗毒蛋白,每5ml收集一个级分,随时用紫外光检
测吸光度,以吸光度对体积作出毒蛋白流出曲线。当洗尽毒蛋白后,在洗脱液中再加入Nacl,
使浓度达0.14mmol/L,可洗脱出血球凝集素[4]。
[5]
对蓖麻碱的
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