骨髓间充质干细胞对肝豆状核变性肝纤维化治疗临床研究专家讲座.pptxVIP

骨髓间充质干细胞对肝豆状核变性

肝纤维化治疗临床研究

脑科医院肝豆状核变性病区

张东锋;主要研究开发内容;申请项目标必要性和依据;

;申请项目标必要性和依据;申请项目标必要性和依据;

国内外相关文件在治疗HLD肝纤维化现实状况

国内外相关文件在治疗HLD肝纤维化尚属空白，已报导药品尚无一个被正式同意应用于临床抗肝纤维化，这是因为;干细胞干预肝纤维化研究现实状况

;

骨髓间充质干细胞治疗肝损害优势

骨髓间充质干细胞取材方便，起源丰富

分化能力强

免疫原性低

没有伦理学障碍，不受道德及法律方面限制

含有跨胚层向多组织细胞分化潜能和自我更新高增值能力。;

本课题意义

骨髓起源间充质干细胞治疗肝豆状核变性造成肝纤维化安全性和有效性还需深入评定

探讨骨髓间充质干细胞移植治疗该病肝纤维化机制也含有主要意义;实施方案

采取临床试验方法，将病人分为三组:

青霉胺组

骨髓间充质干细胞移植干预组;

骨髓间充质干细胞移植干预加青霉胺组。

随访1-2年；治疗后3、6、9、12个月观察患者日常生活能力评价、临床分级评价、细胞因子、基质金属蛋白酶、肝铜含量改变、治疗1年后肝组织活检进行病理检验，所得数据应用SAS处理。

;给药方案

青霉胺组：青霉胺(上海信谊制药企业生产)，剂量为每日40mg/kg，连续8～16周

骨髓间充质干细胞移植干预：将3×l06细胞/ml骨髓间充质干细胞液2ml+生理盐水100ml经静脉移入人体。每10天静脉干细胞移植一次，三次为一个疗程

骨髓间充质干细胞移植干预加青霉胺组：将3×l06细胞/ml骨髓间充质干细胞液2m+生理盐水100ml经静脉移入人体，每10天静脉干细胞移植一次，三次为一个疗程。另将青霉胺（剂量为每日40mg/kg），每日分3次口服，连续8～16周;标本搜集

分别于治疗后3、6、9、12个月抽取病人外周血1.2ml，用于细胞因子、基质金属蛋白酶、肝铜含量检测；

治疗后1年进行肝脏组织病理检验;观察指标与方法

取血1.2ml，血标本经低速冷冻离心(3000转/分)10分钟后取血清约0.5ml进行相关试验项目检测。如：血清生化、肝纤维化???标及相关细胞因子检测

血清铜蓝蛋白采取免疫比浊法，ALT采取比色法，LN、HA采取放射免疫法(RIA)，PDGF、TGFβ1、IL-10、TNF-α、MMP-1及TIMP-1采取ELISA法

肝脏组织病理检验:肝脏标本均作连续切片，每份标本均行下述检验：普通HE染色、胶原纤维采取Masson氏染色、网状纤维采取Gomori染色

肝脏组织铜含量测定采取原子吸收分光光度法检测;统计学分析

数据应用SAS处理，各组间比较采取onewayANOVA分析

;关键技术

肝脏穿刺可能会给病人带来一定痛苦和创伤，我们将请有经验临床医生在彩超监测下进行活检

建立一套稳定检测细胞因子、基质金属蛋白酶、肝铜含量方法直关主要。本试验室检测基质金属蛋白酶时，出现不稳定现象，对于这一问题，我们正请相关教授帮助建立稳定、可靠方法;技术路线;本项目标特色与创新之处

首次应用人骨髓干细胞移植干预HLD患者，为开展骨髓干细胞移植治疗HLD肝纤维化提供新理论、试验依据

;已具备试验伎俩

南方医科大学从属郑州人民医院年成立了院士工作站，并开展了干细胞治疗。与此相适应投入一千万元建立了一个当代化试验室，配置了先进试验设备。有能力提供高质量、高活性细胞

该研究与我们刚取得国家自然基金项目能够共享试验设备和人力资源，我们又投入500多万元，购置了与试验相关设备，如ABI3730XL序列仪、高速冷冻离心机、流式细胞仪、PCR仪、分子生物学平台、高速离心机、悬涡振荡器，磁力搅拌器，PH计，立式高压消毒锅，微波炉等

院士工作站具备完成本课题所需条件;已具备技术力量

;项目标预期经济、社会和环境效益;本项目可取以下几项结果

客观评价骨髓干细胞移植治疗HLD肝纤维化安全性和有效性。

初步探讨骨髓干细胞移植对HLD肝纤维化干预作用机制。

在国内关键期刊发表学术论文1-2篇，SCI杂志发表专业论文1篇。

申报省及市级科技进步奖项

;经费概算