血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座.pptxVIP

血清葡萄糖测定（GOD-POD法）血清测定是临床生物化学检验中常规检测项目之一。血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第1页

试验分为以下部分试验目标试验原理试验试剂试验操作数据分析注意事项临床意义2024/6/292血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第2页

试验目标掌握酶法血清葡萄糖浓度原理掌握血糖改变临床意义2024/6/293血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第3页

试验原理血清葡萄糖是用以过氧化物酶偶联酶反应定量法测定。葡萄糖氧化酶（GOD）利用氧将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，同时释放过氧化氢。过氧化物酶（POD）催化过氧化氢氧化色素原（如4-氨基安替比林和苯酚），并使色素原氧化成色素，即Trinder反应。红色醌类化合物生成量与葡萄糖含量成正比。葡萄糖GOD??红色醌类化合物?POD2024/6/294血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第4页

试验试剂器材5ml移液管，50或100ul微量可调式移液管,721E型分光光度计，1比色皿，37度恒温水浴锅。试剂0.1磷酸盐缓冲液（Ph=7.0）称取无水磷酸二氢钾5.3g，溶于蒸馏水800ml中，调整pH=7.0,定容至1L酶试剂取过氧化物酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮化钠100mg，溶入磷酸盐缓冲液80ml中，调整pH值至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置于4度保留，可稳定存在3个月。酚溶液称取重蒸馏酚100mg，溶入蒸馏水100ml中，用棕色瓶储存。酶-酚混合试剂将酶试剂及酚溶液等量混合，4度可放一个月。2024/6/295血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第5页

试验试剂12mmol苯甲酸钠溶液称取苯甲酸钠1.6g，于800ml蒸馏水中加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至1L。葡萄糖标准储存液（100mmol/L）称取已干燥至恒重无水葡萄糖1.082g，溶入约70ml12mmol/L苯甲酸钠溶液中定容至100ml。2h以后方可使用。葡萄糖标准工作液（5mmol/L）吸收葡萄糖标准储存液5.00ml，置入100ml容量瓶中，用12mmol/L，苯甲酸钠溶液稀释至刻度，混匀。2024/6/296血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第6页

试验操作试剂空白管标准管测定管血清/μL--0.02葡萄糖标准液/μL-0.02-蒸馏水/μL0.02--酶酚混合试剂/μL3.003.003.00混匀，置于37°C水浴中，保温25min，在波长510nm处比色，以空白管调零，读取标准管和测定管吸光度。血清葡萄糖含量=??ⅹ5mmol/dL参考值：3.89-6.11mmol/L2024/6/297血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第7页

注意事项葡萄糖氧化酶法可直接用于测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿液中尿酸等干扰性物质浓度过高，可干扰氧化酶反应，造成结果假性偏低。因红细胞酵解将造成测定结果偏低，提议测定样品以草酸钾-氟化钠为抗凝剂以抑制糖酵解。严重黄疸，溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液，然后在进行测定。2024/6/298血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第8页

临床意义生理性高血糖：可见于摄入高糖食物后，或担心情绪肾上腺素分泌增加时。病理学高血糖：1.糖尿病:病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足糖尿病患者。2.内分泌腺功效障碍：甲状腺功效亢进，肾上腺皮质功效及髓质功效亢进，引发各种反抗胰岛素激素分泌过多，或升高血糖激素增多引发高血糖，现已归入特异性糖尿病中。3.颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤，颅内出血，脑膜炎等，引发血糖增高。4.脱水引发高血糖：如呕吐，腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。生理性低血糖：见于饥饿和猛烈运动时病理性低血糖：特发性功效性低血糖最多见，依次是药源性，肝源性和胰岛素瘤等。2024/6/299血清葡萄糖的测定GODPOD法专家讲座第9页