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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN102659927A
(43)申请公布日2012.09.12
(21)申请号CN201210118230.9
(22)申请日2010.09.17
(71)申请人上海凯茂生物医药有限公司;上海复星医药(集团)股份有限公司
地址201506上海市金山区金山工业区通业路211号1幢6区
(72)发明人周永春张玉晶厉颖
(74)专利代理机构上海光华专利事务所
代理人许亦琳
(51)Int.CI
C07K7/08
C12N15/11
C12N15/85
C12N5/10
C12P21/02
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
一种人工合成的信号肽及其应用
(57)摘要
本发明涉及一种人工合成的信号肽
及其应用。本发明的信号肽的氨基酸序列
选自SEQIDNO:3-5中的任一。本发明的
信号肽可添加于哺乳动物细胞表达载体,用
于引导哺乳动物来源蛋白分泌表达,可将
其在动物细胞中的外源蛋白表达量提高。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
权利要求说明书
1.一种人工合成的用于引导哺乳动物来源蛋白质在哺乳动物细胞中分泌表达的信号
肽,所述信号肽的氨基酸序列选自SEQIDNO:3-5中的任一。
2.如权利要求1所述信号肽用于在哺乳动物宿主细胞中引导哺乳动物来源蛋白的分
泌表达。
3.一种多核苷酸,所述多核苷酸编码权利要求1所述信号肽。
4.如权利要求3所述多核苷酸,其特征在于,所述多核甘酸的序列选自SEQIDNO:
8-10中的任一。
5.一种哺乳动物细胞表达载体,所述表达载体含有权利要求3或4所述多核苷酸及
编码哺乳动物来源的蛋白质的多核苷酸。
6.如权利要求5所述哺乳动物细胞表达载体,其特征在于,权利要求3或4所述多
核苷酸紧接在所述编码哺乳动物来源的蛋白质的多核苷酸前端。
7.如权利要求5所述哺乳动物细胞表达载体,其特征在于,进一步的,所述表达载
体中,权利要求3或4所述多核苷酸的前端添加有Kozak序列。
8.如权利要求5所述哺乳动物细胞表达载体,其特征在于,所述表达载体的启动子
选自EF-1α启动子、CMV启动子、SV40晚期启动子或SV40早期
启动子。
9.如权利要求5所述哺乳动物细胞表达载体,其特征在于,所述哺乳动物来源的蛋
白质选自促红细胞生成素,各种具有促红细胞生成素活性的改
构促红细胞生成素,以及抗体。
10.一种哺乳动物宿主细胞,所述宿主细胞为权利要求5-9任一所述表达载体所转
染。
11.如权利要求10所述哺乳动物宿主细胞,其特征在于,所述哺乳动物宿主细胞为
CHO、BHK、SP2/0或C127。
12.一种哺乳动物来源的蛋白质的生产方法,为在适合表达哺乳动物来源的蛋白质
的条件下,培养权利要求10或11所述哺乳动物宿主细胞,而
后从培养物中分离出所述哺乳动物来源的蛋白质。
13.如权利要求12所述哺乳动物来源的蛋白质的生产方法,其特征在于,所述哺乳
动物来源的蛋白质选自促红细胞生成素,各种具有促红细胞生
成素活性的改构促红细胞生成
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